Equipo porcino modificado para requisitos particulares del análisis de la hormona adrenocorticotrópica ELISA del equipo del bocadillo ELISA de las HORMONAS ADRENOCORTICOTRÓFICAS
Cat.No E0185Po
Principio del análisis
Este equipo del bocadillo ELISA es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo porcino de las HORMONAS ADRENOCORTICOTRÓFICAS. La HORMONA ADRENOCORTICOTRÓFICA presente en la muestra se añade y ata a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo porcino entonces biotinylated de las HORMONAS ADRENOCORTICOTRÓFICAS se añade y ata a las HORMONAS ADRENOCORTICOTRÓFICAS en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al anticuerpo de las HORMONAS ADRENOCORTICOTRÓFICAS de Biotinylated. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad de HORMONAS ADRENOCORTICOTRÓFICAS porcinas. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.
Gama estándar de la curva: 0.2ng/L - 60ng/L
Sensibilidad: 0.093ng/L
Tamaño: 96 pozos
Almacenamiento: Almacene los reactivo en 2-8°C. para el almacenamiento de seis meses excesivo refieren a la fecha de caducidad lo guardan en los ciclos repetidos Avoid del deshielo de -20°C. Si se abren los reactivo individuales se recomienda que el equipo esté utilizado en el plazo de 1 mes.
Uso previsto
Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa exacta de hormona adrenocorticotrópica porcina (también conocida como HORMONAS ADRENOCORTICOTRÓFICAS) en el suero, plasma, supernates del cultivo celular, lysates de la célula, homogenados del tejido.
el producto de los *This está para el uso de la investigación solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes de usar.
Precauciones
- Antes de uso, el equipo y la muestra del bocadillo ELISA se deben calentar naturalmente a la temperatura ambiente 30 minutos.
- Esta instrucción se debe seguir estrictamente en el experimento.
- Una vez que el número deseado de tiras se ha quitado, reselle inmediatamente el bolso para proteger el permanecer contra el deterioro. Cubra todos los reactivo cuando es parado.
- Make sure que mide con una pipeta orden y el índice de adición de bien-a-bien al medir con una pipeta los reactivo.
- La pipeta inclina y el sellador de la placa a disposición debe estar limpio y disponible evitar la contaminación cruzada.
- Evite usar los reactivo de diversos lotes juntos.
- La solución B del substrato es sensible a la luz, no expone la solución B del substrato para encenderse durante mucho tiempo.
- Pare la solución contiene el ácido. Lleve por favor la protección del ojo, de la mano y de piel al usar este material. Evite el contacto de la piel o de las membranas mucosas con el reactivo del equipo.
- El equipo no se debe utilizar más allá de la fecha de caducidad.
Colección de espécimen
El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.
El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante. Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C en el plazo de 30 minutos de la colección.
La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos antedichos.
El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1 million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Tejidos de la aclaración del tejido en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y a pesar antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4) con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
el *Sample no se puede diluir con este equipo. Debido el material utilizamos para preparar el equipo, la interferencia de matriz de la muestra puede presionar falso la especificidad y la exactitud del análisis.
Preparación el reactivo
Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes de usar.
El estándar reconstituye el 120μl del estándar (80ng/L) con 120μl del diluyente estándar para generar una solución común estándar 40ng/L. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos estándar duplicados en serie diluyendo la solución común estándar (40ng/L) 1:2 con el diluyente estándar para producir las soluciones 20ng/L, 10ng/L, 5ng/L y 2.5ng/L. El diluyente estándar sirve como el estándar cero (0 ng/L). Cualquier solución restante se debe congelar en -20°C y utilizar en el plazo de un mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:
| 40ng/L | No.5 estándar | diluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl |
| 20ng/L | No.4 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl |
| 10ng/L | No.3 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl |
| 5ng/L | No.2 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl |
| 2.5ng/L | No.1 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl |
| Concentración estándar | No.5 estándar | No.4 estándar | No.3 estándar | No.2 estándar | No.1 estándar |
| 80ng/L | 40ng/L | 20ng/L | 10ng/L | 5ng/L | 2.5ng/L |
Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 30x del almacenador intermediario del lavado en desionizado o agua destilada para rendir 600 ml de almacenador intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan disuelto totalmente.
Resumen
1. Prepare todos los reactivo, muestras y estándares.
2. Añada la muestra y el reactivo de ELISA en cada uno bien. Incube para 1 hora en 37°C.
3. Lave la placa 5 veces.
4. Añada la solución A y B. Incubate del substrato por 10 minutos en 37°C.
5. Añada paran la solución y el color se convierte.
6. Lea el valor del OD en el plazo de 10 minutos.
