Tipo equipo del bocadillo de la prueba del receptor ELISA del Leptin del ratón altamente sensible con servicio del OEM
Cat.No E0650Mo
Reactivo proporcionado
| Componentes |
Cantidad |
| Solución estándar (32ng/ml) |
0.5ml x1 |
| Placa cubierta primero de ELISA |
12 * 8 tiras bien x1 |
| Diluyente estándar |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Pare la solución |
6ml x1 |
| Solución A del substrato |
6ml x1 |
| Solución B del substrato |
6ml x1 |
| Concentrado del almacenador intermediario del lavado (25x) |
20ml x1 |
| Anticuerpo del ratón LR/Ob-R de Biotinylated |
1ml x1 |
| Instrucción del usuario |
1 |
| Sellador de la placa |
2 imágenes |
| Bolso de la cremallera |
1 imagen |
Material requerido pero no suministrado
- Incubadora 37°C±0.5°C
- Papel absorbente
- Pipetas de la precisión y extremidades disponibles de la pipeta
- Limpie los tubos
- Desionizado o agua destilada
- Lector de Microplate con 450 el filtro de la longitud de onda del ± 10nm
Uso previsto
Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa exacta de receptor del Leptin del ratón (también conocido como LR/Ob-R) en el suero, plasma, supernates del cultivo celular, lysates de la célula, homogenados del tejido.
Precisión
La precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en una placa para evaluar la precisión del intra-análisis.
La precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en análisis separados para evaluar la precisión del inter-análisis.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-análisis: CV<8>
Inter-análisis: CV<10>
Gama estándar de la curva: 0.05ng/ml - 30ng/ml
Sensibilidad: 0.022ng/ml
Almacenamiento: Almacene los reactivo en 2-8°C. para el almacenamiento de seis meses excesivo refieren a la fecha de caducidad lo guardan en los ciclos repetidos Avoid del deshielo de -20°C. Si se abren los reactivo individuales se recomienda que el equipo esté utilizado en el plazo de 1 mes.
el producto de los *This está para el uso de la investigación solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes de usar.
Preparación el reactivo
Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes de usar.
El estándar reconstituye el 120μl del estándar (32ng/ml) con 120μl del diluyente estándar para generar una solución común estándar 16ng/ml. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos estándar duplicados en serie diluyendo el 1:2 estándar de la solución común (16ng/ml) con diluyente estándar para producir las soluciones 8ng/ml, 4ng/ml, 2ng/ml y 1ng/ml. El diluyente estándar sirve como el estándar cero (0 ng/ml). Cualquier solución restante se debe congelar en -20°C y utilizar en el plazo de un mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:
| 16ng/ml |
No.5 estándar |
diluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl |
| 8ng/ml |
No.4 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl |
| 4ng/ml |
No.3 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl |
| 2ng/ml |
No.2 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl |
| 1ng/ml |
No.1 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl |
| Concentración estándar |
No.5 estándar |
No.4 estándar |
No.3 estándar |
No.2 estándar |
No.1 estándar |
| 32ng/ml |
16ng/ml |
8ng/ml |
4ng/ml |
2ng/ml |
1ng/ml |
Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 25x del almacenador intermediario del lavado en desionizado o agua destilada para rendir 500 ml de almacenador intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan disuelto totalmente.
Resumen
1. Prepare todos los reactivo, muestras y estándares.
2. Añada la muestra y el reactivo de ELISA en cada uno bien. Incube para 1 hora en 37°C.
3. Lave la placa 5 veces.
4. Añada la solución A y B. Incubate del substrato por 10 minutos en 37°C.
5. Añada paran la solución y el color se convierte.
6. Lea el valor del OD en el plazo de 10 minutos.
Cálculo del resultado
Construya una curva estándar trazando el OD medio para cada uno estándar en (y) el eje vertical contra la concentración en (x) el eje horizontal y dibuje una curva del mejor ajuste a través de los puntos en el gráfico. Estos cálculos se pueden realizar mejor con software computarizado de la curva-colocación y la línea del mejor ajuste se puede determinar por análisis de regresión.
Referances
“Characterizaton de los isoforms cortos del receptor del leptin en microvessels cerebrales de la rata y de la absorción del cerebro del leptin en modelos del ratón de la obesidad.”
Hileman S.M., Pierroz D.D., Masuzaki H., Bjoerbaek C., EL-Haschimi K., deposita W.A., aviador J.S.
Endocrinología 143:775- 783(2002)
