Placa bovina del pozo del equipo 96 de la precisión de la investigación del laboratorio alta y del análisis de la sensibilidad BHBA ELISA
Cat.No E0267Bo
Uso previsto
Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa exacta de ácido Beta-hidroxibutírico bovino (también conocido como BHBA) en el suero, plasma, supernates del cultivo celular, lysates de la célula, homogenados del tejido.
Precisión
La precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en una placa para evaluar la precisión del intra-análisis.
La precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en análisis separados para evaluar la precisión del inter-análisis.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-análisis: CV<8>
Inter-análisis: CV<10>
Principio del análisis
Este equipo del análisis de ELISA es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo bovino de BHBA. BHBA presentan en la muestra se añaden y atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo bovino entonces biotinylated de BHBA se añade y ata a BHBA en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al anticuerpo de Biotinylated BHBA. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad de BHBA bovino. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.
Reactivo proporcionado
| Componentes |
Cantidad |
| Solución estándar (4800nmol/ml) |
0.5ml x1 |
| Placa cubierta primero de ELISA |
12 * 8 tiras bien x1 |
| Diluyente estándar |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Pare la solución |
6ml x1 |
| Solución A del substrato |
6ml x1 |
| Solución B del substrato |
6ml x1 |
| Concentrado del almacenador intermediario del lavado (30x) |
20ml x1 |
| Anticuerpo bovino de Biotinylated BHBA |
1ml x1 |
| Instrucción del usuario |
1 |
| Sellador de la placa |
2 imágenes |
| Bolso de la cremallera |
1 imagen |
Material requerido pero no suministrado
- Incubadora 37°C±0.5°C
- Papel absorbente
- Pipetas de la precisión y extremidades disponibles de la pipeta
- Limpie los tubos
- Desionizado o agua destilada
- Lector de Microplate con 450 el filtro de la longitud de onda del ± 10nm
Precauciones
- Antes de uso, el equipo y la muestra del análisis de ELISA se deben calentar naturalmente a la temperatura ambiente 30 minutos.
- Esta instrucción se debe seguir estrictamente en el experimento.
- Una vez que el número deseado de tiras se ha quitado, reselle inmediatamente el bolso para proteger el permanecer contra el deterioro. Cubra todos los reactivo cuando es parado.
- Make sure que mide con una pipeta orden y el índice de adición de bien-a-bien al medir con una pipeta los reactivo.
- La pipeta inclina y el sellador de la placa a disposición debe estar limpio y disponible evitar la contaminación cruzada.
- Evite usar los reactivo de diversos lotes juntos.
- La solución B del substrato es sensible a la luz, no expone la solución B del substrato para encenderse durante mucho tiempo.
- Pare la solución contiene el ácido. Lleve por favor la protección del ojo, de la mano y de piel al usar este material. Evite el contacto de la piel o de las membranas mucosas con el reactivo del equipo.
- El equipo del análisis de ELISA no se debe utilizar más allá de la fecha de caducidad.
Preparación el reactivo
Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes de usar.
El estándar reconstituye el 120μl del estándar (4800nmol/ml) con 120μl del diluyente estándar para generar una solución común estándar 2400nmol/ml. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos estándar duplicados en serie diluyendo el 1:2 estándar de la solución común (2400nmol/ml) con diluyente estándar para producir las soluciones 1200nmol/ml, 600nmol/ml, 300nmol/ml y 150nmol/ml. El diluyente estándar sirve como el estándar cero (0 nmol/ml). Cualquier solución restante se debe congelar en -20°C y utilizar en el plazo de un mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:
| 2400nmol/ml |
No.5 estándar |
diluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl |
| 1200nmol/ml |
No.4 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl |
| 600nmol/ml |
No.3 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl |
| 300nmol/ml |
No.2 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl |
| 150nmol/ml |
No.1 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl |
| Concentración estándar |
No.5 estándar |
No.4 estándar |
No.3 estándar |
No.2 estándar |
No.1 estándar |
| 4800nmol/ml |
2400nmol/ml |
1200nmol/ml |
600nmol/ml |
300nmol/ml |
150nmol/ml |
Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 30x del almacenador intermediario del lavado en desionizado o agua destilada para rendir 600 ml de almacenador intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan disuelto totalmente.
Resumen
1. Prepare todos los reactivo, muestras y estándares.
2. Añada la muestra y el reactivo de ELISA en cada uno bien. Incube para 1 hora en 37°C.
3. Lave la placa 5 veces.
4. Añada la solución A y B. Incubate del substrato por 10 minutos en 37°C.
5. Añada paran la solución y el color se convierte.
6. Lea el valor del OD en el plazo de 10 minutos.
