96 equipo beta-defensin de Sensitivie 4 ELISA del ratón de los pozos alto
Cat.No E1204Mo
Almacenamiento: Almacene los reactivo en 2-8°C. para el almacenamiento de seis meses excesivo refieren a la fecha de caducidad lo guardan en los ciclos repetidos Avoid del deshielo de -20°C. Si se abren los reactivo individuales se recomienda que el equipo esté utilizado en el plazo de 1 mes.
* este producto está para el uso de la investigación solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes de usar.
Principio del análisis
Este equipo es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo del ratón DEFB4. DEFB4 presentan en la muestra se añaden y atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo entonces biotinylated del ratón DEFB4 se añade y ata a DEFB4 en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al anticuerpo de Biotinylated DEFB4. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad del ratón DEFB4. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.
Reactivo proporcionado
| Componentes |
Cantidad |
| Solución estándar (12.8ng/ml) |
0.5ml x1 |
| Placa cubierta primero de ELISA |
12 * 8 tiras bien x1 |
| Diluyente estándar |
3ml x1 |
| Streptavidin-HRP |
6ml x1 |
| Pare la solución |
6ml x1 |
| Solución A del substrato |
6ml x1 |
| Solución B del substrato |
6ml x1 |
| Concentrado del almacenador intermediario del lavado (30x) |
20ml x1 |
| Anticuerpo del ratón DEFB4 de Biotinylated |
1ml x1 |
| Instrucción del usuario |
1 |
| Sellador de la placa |
2 imágenes |
| Bolso de la cremallera |
1 imagen |
Preparación el reactivo
Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes de usar.
El estándar reconstituye el 120μl del estándar (12.8ng/ml) con 120μl del diluyente estándar para generar una solución común estándar 6.4ng/ml. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos estándar duplicados en serie diluyendo el 1:2 estándar de la solución común (6.4ng/ml) con diluyente estándar para producir las soluciones 3.2ng/ml, 1.6ng/ml, 0.8ng/ml y 0.4ng/ml. El diluyente estándar sirve como el estándar cero (0 ng/ml). Cualquier solución restante se debe congelar en -20°C y utilizar en el plazo de un mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:
| 6.4ng/ml |
No.5 estándar |
diluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl |
| 3.2ng/ml |
No.4 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl |
| 1.6ng/ml |
No.3 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl |
| 0.8ng/ml |
No.2 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl |
| 0.4ng/ml |
No.1 estándar |
120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl |
| Concentración estándar |
No.5 estándar |
No.4 estándar |
No.3 estándar |
No.2 estándar |
No.1 estándar |
| 12.8ng/ml |
6.4ng/ml |
3.2ng/ml |
1.6ng/ml |
0.8ng/ml |
0.4ng/ml |
Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 30x del almacenador intermediario del lavado en desionizado o agua destilada para rendir 500 ml de almacenador intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan disuelto totalmente.
Resumen
- Prepare todos los reactivo, muestras y estándares.
- Añada el reactivo amplio y de ELISA en cada uno bien. Incube para 1 hora en 37°C.
-
Lave la placa 5 veces.
-
Añada la solución A y B. Incubate del substrato por 10 minutos en 37°C.
-
Añada paran la solución y el color se convierte.
-
Lea el valor del OD en el plazo de 10 minutos.
Referencias
Morrison G.M., Semple C.A.M., Kilanowski F.M., colina R.E., Dorin J.R.
Mol. Biol. Evol. 20:460- 470(2003)
