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Canis de Ehrlichia (E.C) equipo fluorescente ácido nucléico de la punta de prueba del taqman de la prueba de la polimerización en cadena de la amplificación
Uso previsto:
Este equipo es conveniente para la detección específica de canis de
Ehrlichia (E.C) en muestras de sangre enteras del EDTA canino.
Principio:
Esta punta de prueba específica del gen del diseño conservador del
canis de Ehrlichia del uso del equipo, la punta de prueba puede con
área de la amplificación de la cartilla en el medio de una
plantilla obligatoria específica de la DNA, en curso de extensión
de la polimerización en cadena, las enzimas circunscritas de la
polimerasa de Taq del 5" extremo de grupos fluorescentes en la
punta de prueba será reducida, hace libre en el sistema de
reacción, de tal modo apagando a grupos fuera del 3" extremo, el
resplandor, polimerización en cadena de la fluorescencia fue
utilizada para detectar el ácido nucléico del canis de Ehrlichia en
un sistema de reacción totalmente cerrado.
Componentes principales:
Componente | Cantidad | Condición de almacenamiento |
Líquido de la reacción de la polimerización en cadena | 8 tubos | -20±5℃ |
Control positivo | 1 tubo | |
Control negativo | 1 tubo |
Nota: los componentes en diversos lotes de equipos no deben ser permutables.
Requisitos de la muestra:
1. Tipo de la muestra
Sangre entera etc. del EDTA canino.
2. colección y transporte de la muestra
Muestree la colección y el transporte será realizado de acuerdo con
NY/T 541. Las muestras serán transportadas al laboratorio cuanto
antes bajo condiciones refrigeradas para evitar hielo-deshielo
repetida.
3. preservación de la muestra
Puede ser almacenado por 24 horas en 2℃~8℃, y puede ser almacenado
durante mucho tiempo en -70℃.
Calibración del método:
Amplificación de la polimerización en cadena y detección de la
fluorescencia (área de la detección de la polimerización en cadena)
Ponga cada tubo de la reacción en el instrumento de la
polimerización en cadena y realice la amplificación de la
polimerización en cadena según los procedimientos siguientes:
Paso | Número de ciclo | Temperatura | Tiempo |
1 | 1 | 95℃ | 3min |
2 | 45 | 95℃ | 10s |
60℃ | 30s recogen fluorescente |
FAM se selecciona para los canales de la detección.
Valor del juicio o intervalo positivo de la referencia
Resultados | Valor del Ct |
Positivo | Ct≤40 |
Negativa | Ningún valor o Ct value≥45 del Ct |
Área de gris | 40<Ct<45> |
Nota: El resultado se juzga para ser el área gris, que necesita ser
vuelta a inspeccionar. Si vuelva a inspeccionar el resultado es
valor del Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
¡Los detalles de la operación satisfacen comprueban de IFU!