Polimerización en cadena en tiempo real ácida nucléica del múltiplex de la amplificación de Enterocytozoon Hepatopenaei-18s

Equipos ácidos nucléicos de la detección de Enterocytozoon hepatopenaei-18s (EHP-18S)

(Método Polimerización en cadena-fluorescente de la punta de prueba)
 
 
Uso previsto:
 
Este equipo es conveniente para la cuarentena del hepatopenaei -18S (EHP-18S) de Enterocytozoon antes de la compra de larvas en los camarones desala la planta para asegurarse de que las larvas no llevan el patógeno de la enfermedad. Las empresas de la acuicultura han conducido la detección específica de EHP en el fango inferior de las charcas de la acuicultura con el crecimiento lento de la gamba para excluir el peligro ocultado del hígado y del parasitization intestinal del cytiworm.
 
Principio:
 
En este equipo, las cartillas sondan fueron diseñadas usando un fragmento específico del hepatopenaei -18S (EHP-18S) de Enterocytozoon. La punta de prueba podía atar específicamente a una plantilla de la DNA en el medio de la región de la amplificación de la cartilla. Durante el proceso de la extensión de la polimerización en cadena, la actividad del exonuclease de la enzima de Taq cortó el 5" - terminal fluoróforo de la punta de prueba y lo hizo libre en el sistema de reacción. Así, el 3" - separaron al grupo apagado extremo, y la fluorescencia fue emitida, que fue detectada por el instrumento de la polimerización en cadena de la fluorescencia, y la detección de ácido nucléico de eHP-18S fue observada en el sistema de reacción totalmente cerrado.
 
Componentes principales:
 

 
Requisitos de la muestra:
 

1. Tipo de la muestra

Almácigos: padre, huevos del camarón, almácigos, productos estándar gruesos

Charca: fango inferior, excremento, cuerpo del agua

Cebo: el cebo vivo, el cebo enfriado y la no-alto-temperatura trataron muestras del cebo

2. Transporte

Muestree la colección y el transporte será realizado de acuerdo con NY/T 541. Las muestras serán transportadas al laboratorio cuanto antes bajo condiciones refrigeradas para evitar hielo-deshielo repetida.

3. Preservación de la muestra

Puede ser almacenado por 24 horas en 2℃~8℃, y puede ser almacenado durante mucho tiempo en -20℃.

 
Usando Micgene 242/244/244IVD y ABI QuantStudio 5:
 
los procedimientos se fijan como abajo:

FAM fue seleccionado para el canal de la detección.
 
Los resultados de la interpretación

Nota: El resultado se juzga para ser el área gris, que necesita ser vuelta a inspeccionar. Si vuelva a inspeccionar el resultado es valor del Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
 
Análisis del resultado:
Análisis automático usando la instrumentación
 
Control de calidad:
Control negativo: Ninguna curva obvia de la amplificación del canal de la detección de FAM;
Control positivo: El canal de FAM mostró la curva obvia de la amplificación, valor ≤30 del Ct;
 
Las condiciones antedichas se cumplen simultáneamente en el mismo experimento; de otra manera, el experimento es inválido y se requiere el reexaminar.
 
 

La bio salud dominante es una empresa de alta tecnología con la integración del R&D, de la producción y de sales&marketing en Guangzhou. Desde 2003. La bio llave fue fundada por el equipo emprendedor de “mil programas de los talentos” y el equipo mayor de ultramar del ingeniero de desarrollo del equipo de la automatización.

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Tiene varias tecnologías independientes de base en los campos de la ingeniería de la automatización, de la fabricación de la micro-precisión, de la inmunofluorescencia, de la detección ácida nucléica y de la secuencia del gen. Desde su establecimiento, la compañía ha solicitado más de 60 patentes y tiene actualmente 17 patentes autorizadas. La compañía tiene dos centros del R&D para los reactivo y los instrumentos y equipo de diagnóstico, sumando más de 500 metros cuadrados; ha establecido más de 2.000 metros cuadrados de talleres del GMP y de instalaciones de producción de equipo; tiene nueva tecnología inmune de la detección de SmartTRF, la tecnología ácida nucléica de la detección (POCT) y tres servicios científicos.