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Equipos ácidos nucléicos de la detección del hepatopenaei de Enterocytozoon
(Método Polimerización en cadena-fluorescente de la punta de
prueba)
Uso previsto:
Este equipo se solicita la inspección de la cuarentena de dectecting el virus del hepatopenaei de
Enterocytozoon (EHP) antes de comprar larvas en camarón desala la
planta para asegurarse de que las larvas no llevan el patógeno de la enfermedad. Las empresas de la acuicultura han conducido la
detección específica de EHP en el fango inferior de las charcas de
la acuicultura con el crecimiento lento de la gamba para excluir el
peligro ocultado del hígado y del parasitization intestinal del
cytiworm.
Principio:
Este equipo es el fragmento específico subcutáneo y hematopoyético
infeccioso elegido a la punta de prueba de la punta de prueba de
las cartillas del diseño, la punta de prueba del virus de la
necrosis del órgano (IHHNV) con área de la amplificación de la
cartilla en el medio de una plantilla obligatoria específica de la
DNA, en curso de extensión de la polimerización en cadena, las
enzimas circunscritas de la polimerasa de Taq del 5" extremo de
grupos fluorescentes en la punta de prueba será reducido, hace
libre en el sistema de reacción, así, el 3" - separaron al grupo
apagado extremo y la fluorescencia fue emitida, que fue detectada
por el instrumento de la polimerización en cadena de la
fluorescencia para realizar la detección del virus subcutáneo y
hematopoyético infeccioso de la necrosis (IHHNV) en un sistema de
reacción totalmente cerrado.
Componentes principales:
Componente | Especificación |
Líquido de la reacción de la polimerización en cadena | 24 tubos |
Control positivo | 1 tubo |
Control negativo | 1 tubo |
Requisitos de la muestra:
1. Tipo de la muestra
Almácigos: padre, huevos del camarón, almácigos, productos estándar gruesos
Charca: fango inferior, excremento, cuerpo del agua
Cebo: el cebo vivo, el cebo enfriado y la no-alto-temperatura trataron muestras del cebo
2. Transporte
Muestree la colección y el transporte será realizado de acuerdo con NY/T 541. Las muestras serán transportadas al laboratorio cuanto antes bajo condiciones refrigeradas para evitar hielo-deshielo repetida.
3. Preservación de la muestra
Puede ser almacenado por 24 horas en 2℃~8℃, y puede ser almacenado
durante mucho tiempo en -20℃.
Usando Micgene 242/244/244IVD y ABI QuantStudio 5:
los procedimientos se fijan como abajo:
Pasos | Número de ciclo | Temperatura | Tiempo |
1 | 1 | 95℃ | 3min |
2 | 45 | 95℃ | 10s |
60℃ | 30sCollect el fluorescente |
FAM fue seleccionado para el canal de la detección.
Los resultados de la interpretación
Resultados | Valor del Ct |
Positivo | Ct≤40 |
Negativa | Ningún valor o Ct value≥45 del Ct |
Área de gris | 40<Ct<45> |
Nota: El resultado se juzga para ser el área gris, que necesita ser
vuelta a inspeccionar. Si vuelva a inspeccionar el resultado es
valor del Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Análisis del resultado:
Análisis automático usando la instrumentación
Control de calidad:
Control negativo: Ninguna curva obvia de la amplificación del canal
de la detección de FAM;
Control positivo: El canal de FAM mostró la curva obvia de la
amplificación, valor ≤30 del Ct;
Las condiciones antedichas se cumplen simultáneamente en el mismo
experimento; de otra manera, el experimento es inválido y se
requiere el reexaminar.
¡Los detalles comprueban por favor de IFU!