equipos de prueba de la micotoxina de 0.1ppb Zearalenone para el maíz 96 Wells/equipo de la alimentación

Zearalenone ELISA Test Kit para el maíz 96 Wells/Kit Sensitivity de la alimentación 0,1 ppb

1. Principio

Este equipo de la prueba se basa en el immunoensayo competitivo de la enzima para la detección de Zearalenone. El antígeno de acoplamiento se cubre primero en las rayas micro-bien. El Zearalenone en la muestra y los antígenos de acoplamiento cubiertos primero en las rayas micro-bien compiten para los anticuerpos antis de Zearalenone. Después de que la adición de la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añada para la coloración. El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con el Zearalenone en la muestra. Este valor se compara a la curva estándar y los residuos de Zearalenone se obtienen posteriormente.

2. Especificaciones técnicas

Sensibilidad: 0,1 ppb
Temperatura de la incubadora: 25℃
Tiempo de la incubadora: 30min~15min

Límite de detección:
Alimentación 10ppb
Arroz, maíz, cacahuete 5ppb

Tarifa del reacción cruzado:
Zearalenone 100%

Tarifa de recuperación:
Alimentación, arroz, cacahuete, maíz el 100±30%

3. Componentes

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Equipo: ELISA Reader (450 nm/630nm), homogeneizador, coctelera, centrifugadora, balanza: 0.01g cantidad sensible, dispositivo de la nitrógeno-sequedad, incubadora, pipetas graduadas, impresora
2) micropipetas: 20l monocanal ~ 200l, 100l ~ 1000l, μl de varios canales 30~300
3) reactivo: Metanol, n-hexano.

5. Tratamiento previo de la muestra

Instrucciones (los puntos siguientes se deben ocupar antes del tratamiento previo)
1) solamente las extremidades disponibles se pueden utilizar para los experimentos y las extremidades deben ser cambiadas cuando están utilizadas para absorber diversos reactivo;
2) antes del experimento, cada utensilio experimental debe ser limpio y se debe re-limpiar en caso de necesidad, para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:
No. 1 de la solución: Muestree la redisolución
El 2×concentrated que redisuelve la solución se diluye con agua desionizada en el 1:1 (1part concentró la redisolución de la solución + del agua desionizada 1part), usado para la redisolución de la muestra.
No. 2 de la solución: Solución del extracto de muestra
7 porciones de metanol + 3 porciones de agua desionizada para obtener la solución lista para utilizar del extracto de muestra.

Preparación de las muestras
5,1 preparación de la muestra de la alimentación
1) toma 1.0±0.05g grinded la muestra de la alimentación en el tubo de centrífuga 50ml, añade la solución del extracto de muestra 5ml;
2) sacudida totalmente para 3min (o sacudir a mano para sobre 5min), centrifugadora en sobre 4000r/min en 20℃ para el minuto 10;
3) el sobrenadante de la toma 50ul (para arriba-capa), añade la muestra 950ul que redisuelve, sacude a uniformemente;
4) toma 50μl para probar
Factor del dilución: 100
Nota: si la concentración del residuo de la droga en la muestra está fuera de gama de la curva, la muestra se puede diluir más a fondo para la prueba (por ejemplo: tome el sobrenadante 50ul (para arriba-capa) en un nuevo tubo de centrífuga, añada 1450ul desionizó el agua, el factor del dilución es 150).

5.2Preparation del maíz, muestra del arroz
1) toma 1.0±0.05g grinded la muestra en el tubo de centrífuga 50ml; añada la solución del extracto de muestra 5ml;
2) sacudida totalmente para 3min (o sacudir a mano para sobre 5min), centrifugadora en sobre 4000r/min en 20℃ para el minuto 10;
3) el sobrenadante de la toma 100ul (para arriba-capa), añade la muestra 900ul que redisuelve, sacude a uniformemente;
4) toma 50μl para probar
Factor del dilución: 50
Nota: Si la concentración del residuo de la droga de la muestra está fuera de gama de la curva, la muestra se puede diluir más a fondo para la prueba (por ejemplo: tome el sobrenadante 50ul (para arriba-capa) en un nuevo tubo de centrífuga, añada el agua desionizada 950, el factor del dilución es 100).

5.3Preparation de la muestra del cacahuete
1) toma 1.0±0.05g grinded la muestra del cacahuete en el tubo de centrífuga 50ml; añada la solución del extracto de muestra 5ml, después añada el n-hexano 4ml;
2) sacudida totalmente para 3min (o sacudir a mano para sobre 5min), centrifugadora en sobre 4000r/min en 20℃ para el minuto 10;
3) el líquido claro de la para arriba-capa del descarte, toma el líquido de la medio-capa 100ul, añade la muestra 900ul que redisuelve, sacude a uniformemente;
4) toma 50μl para probar
Factor del dilución: 50
Nota: Si la concentración del residuo de la droga de la muestra está fuera de gama de la curva, la muestra se puede diluir más a fondo para la prueba (por ejemplo: tome el líquido de la medio-capa 50ul en un nuevo tubo de centrífuga, añada el agua desionizada 950, el factor del dilución es 100).

6. Procedimientos de ELISA

6,1 instrucciones
1. traiga los reactivo de ELISA a la temperatura ambiente (20 - el °C) 25 antes de usar.
2. ponga los reactivo de ELISA de nuevo al ℃ 2-8 inmediatamente después del uso
3. La reproductibilidad de ELISA en el proceso del análisis es depende en gran parte de la consistencia de la placa que se lava, la operación correcta de la placa que se lava es el punto del programa de la determinación ELISA
4. En todo el proceso de la incubación de la temperatura constante, evite la exposición luminosa, sello el microplate con la membrana de la cubierta.

6,2 procedimientos de la operación

1. Ponga el equipo en la temperatura ambiente (20-25°C) por lo menos 30 minutos, observan que cada reactivo se debe sacudir mucho antes uso;
2. lugar las tiras deseadas del microwell en el marco de la placa. Los microplates inusitados se deben resellar y almacenar en 2-8°C, no congelado.
3. preparación de la solución: Tome 40ml de 20× concentró el almacenador intermediario que se lava y disolverlo en agua desionizada en un ratio del 1:19 (1 porción del almacenador intermediario concentrado 20× del lavado + 19 porciones de agua desionizada), o se preparan según las necesidades.
4. enumeración: Numere los microwells según las muestras y las soluciones estándar; cada muestra y solución estándar se deben hacer dos veces; registre sus posiciones.
5. añada el estándar/la muestra: Añada el µL 50 de la muestra o la solución estándar para separar pozos dobles, entonces añade la conjugación de la enzima, 50 µL/well; entonces solución de funcionamiento del anticuerpo, 50 µL/well. Mézclese suavemente sacudiendo la placa a mano, el sello el microplate con una película de la cubierta, e incube en el °C 25 para el minuto 30 en la oscuridad.
6. lavado el microplate: Abra cuidadosamente la película de la cubierta y vierta el líquido en el microwell; añada 250 µL/well del almacenador intermediario del lavado, lave a fondo 4-5 veces para 15-30 s cada vez, después quítelas con el papel absorbente Pat seco. (Pinche las burbujas de aire con una lanza inusitada después de secar)
7. desarrollo del color: Añada el µL 50 de la solución del substrato A a cada pozo, seguido por el µL 50 de la solución B. Mix suavemente sacudiendo la placa a mano e incube para el minuto 15 en el °C 25 en la oscuridad para manchar.
8. análisis: Añada el µL 50 de la solución de la parada a cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa a mano. Fije la longitud de onda del lector del microplate a 450 nanómetro para determinar el valor del OD de cada pozo. (Se recomienda para leer valores del OD en las longitudes de onda duales 450/630 nanómetro en el plazo de 5 minutos).

7. Juicio del resultado

Hay dos métodos para juzgar los resultados; primer es el juicio áspero, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa. Nota que el valor del OD de la muestra tiene una correlación negativa con el Zearalenone en la muestra
7,1 determinación cualitativa
La gama de concentración (ppb) puede ser obtenida por comparado el valor medio de la absorción con estándares. Suponga que valor de la absorción de la muestra una es 0,3, la muestra dos es 1,0, y los estándares son: 0ppb de 2,243; 0.1ppb de 1,816; 0.3ppb de 1,415; 0.9ppb de 0,74; 2.7ppb de 0,313; 8.1ppb de 0,155. Entonces la concentración de la muestra una está en el rango de 2.7ppb ~ 8.1ppb; La muestra dos es 0.3ppb ~ 0.9ppb. La gama de concentración de Zearalenone en las muestras puede ser obtenida por multiplicado por el dilución correspondiente de la muestra.
7. análisis cuantitativo 2
Para calcular la concentración de muestras, una curva estándar debe ser hecha. Antes de que se haga la curva estándar, el concepto de % de la absorción debe ser saber.
Cálculo de % de la absorción:

Valor del OD de la media de B-the de la muestra o de la solución estándar
Valor del OD de la media de B0-the de las 0 soluciones estándar de ng/mL
El estándar cero así se hace igual hasta el 100% y los valores de la absorción se citan en porcentajes. Los valores calculaban para los estándares se entran en un sistema de coordenadas en el papel cuadriculado semilogarithmic contra el concentración de Zearalenone [ng/mL]. La concentración de Zearalenone en ng/ml correspondiente a la absorción de cada muestra se puede leer en la curva de calibración.
Un software especial para el análisis del resultado de ELISA facilitará determinaciones dobles o múltiples. Si usted necesita, llame por favor para pedir.

8. Precauciones

1. La temperatura ambiente debajo del ℃ 25 o la temperatura de los reactivo y de las muestras que no son vueltos a la temperatura ambiente (℃ 20-25) llevará a un valor estándar más bajo del OD.
2. la sequedad del microplate en el proceso que se lava será acompañada por las situaciones incluyendo las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable; Continúe tan al paso siguiente inmediatamente después del lavado.
3. mezcla uniformemente antes de añadir cualesquiera reactivo.
4. La solución de la parada es la solución ácida sulfúrica de 2 M, evita entrar en contacto con con la piel.
5. No utilice el equipo que excede su fecha de vencimiento. El uso de reactivo diluidos o adulterados de los equipos llevará a los cambios en la sensibilidad y los valores de detección del OD. No intercambie los reactivo de los equipos de diversos números de lote para utilizar.
6. almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado. Ponga el microplate inusitado en un bolso del auto-lacre para resellarlo. La sustancia estándar y el color descolorido anteriores es sensibles a la luz, y no pueden ser expuestos así directamente a la luz.
7. deseche la solución de la coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución. El valor de detección (450/630nm) de las 0 soluciones estándar (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0> 8. La temperatura óptima de la reacción es el ℃ 25, y las temperaturas demasiado altas o demasiado bajas darán lugar a los cambios en la sensibilidad de detección y valores del OD.

9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento

Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.
Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.
Nota: Si el envasado al vacío del microplate tiene salida, es todavía válido utilizar, no afecta al resultado de la prueba, sea relajarse para utilizar.

Q1: ¿Cuándo será enviado?
A1: Enviaremos las mercancías para usted cuanto antes en el plazo de 7 días laborables después de recibir el pago. (En caso de factores externos tales como la epidemia, la entrega puede ser retrasada)

Q2: ¿Apoya OEM/ODM?
A2: Puede ser apoyado, pero la cantidad específica necesita ser más de 100.000 pedazos, que es conveniente para los productos modificados para requisitos particulares.

Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Nacionalmente hemos certificado ISO9001 e ISO13485. Nuestro proceso de producción se ajusta a los procedimientos estándar para asegurar calidad del producto óptima.

Q4: ¿Cómo proporcionar el servicio post-venta?
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Q5: ¿Cuál es la forma de pago?
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Q6: ¿Cómo enviar?
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