La prueba Kit ELISA Aflatoxin Testing Equipment For del cacahuete del T-2 de Trichothecenes alimenta el arroz 3ppb

Equipo de la prueba de Trichothecenes (T-2) ELISA para el arroz 96 Wells/equipo del cacahuete de la alimentación

1. Principio

Este equipo de la prueba se basa en el immunoensayo competitivo de la enzima para la detección de Trichothecenes (T-2). El antígeno de acoplamiento se cubre primero en las rayas micro-bien. El Trichothecenes (T-2) en la muestra y los antígenos de acoplamiento cubiertos primero en las rayas micro-bien compiten para los anticuerpos antis de Trichothecenes (T-2). Después de que la adición de la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añada para la coloración. El valor de la densidad óptica (OD) de la muestra tiene una correlación negativa con el Trichothecenes (T-2) en la muestra. Este valor se compara a la curva estándar y los residuos de Trichothecenes (T-2) se obtienen posteriormente.

2. Especificaciones técnicas

Sensibilidad: 0,05 ppb
Temperatura de la incubadora: 25℃
Tiempo de la incubadora: 30min~15min
Límite de detección:
Alimentación, cacahuete, arroz 3ppb
Tarifa del reacción cruzado:
Trichothecenes (T-2) 100%
Tarifa de recuperación:
Alimentación, arroz el 90±25%
Cacahuete el 85±25%

3. Componentes

4. Materiales requeridos pero no proporcionados

1) Equipo: ELISA Reader (450 nm/630nm), homogeneizador, coctelera, centrifugadora, balanza: 0.01g cantidad sensible, dispositivo de la nitrógeno-sequedad, incubadora, pipetas graduadas, impresora
2) micropipetas: 20ml monocanal ~ 200ml, 100ml ~ 1000ml, μl de varios canales 30~300
3) reactivo: Metanol.

5. Tratamiento previo de la muestra

Instrucciones (los puntos siguientes se deben ocupar antes del tratamiento previo)
1) solamente las extremidades disponibles se pueden utilizar para los experimentos y las extremidades deben ser cambiadas cuando están utilizadas para absorber diversos reactivo;
2) antes del experimento, cada utensilio experimental debe ser limpio y se debe re-limpiar en caso de necesidad, para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:
1) solución de Sampleredissolving
Utilice 1 porción (5X) de concentrado redisolviendo la solución y disolver con 4 porciones de agua desionizada para obtener la muestra lista para utilizar que redisuelve la solución.
2) solución del extracto de muestra
Utilice 1 porción de metanol y disuelva con 1 porción de la muestra que redisuelve la solución para obtener la solución lista para utilizar del extracto de muestra.
Preparación de la alimentación, cacahuete, muestra del arroz

1) La toma 1.0±0.05g grinded la muestra en el tubo de centrífuga 50ml, añade la solución del extracto de muestra 5ml, sacudida para 3min, centrifugadora en sobre 4000r/min en 20℃ para el minuto 10;
2) el sobrenadante de la toma 100ul (para arriba-capa), añade la muestra 400ul que redisuelve la solución, sacude a uniformemente;
3) toma 50μl para probar
Factor del dilución: 25

6. Procedimientos de ELISA

6,1 instrucciones

1) trae los reactivo de ELISA a la temperatura ambiente (20 - el °C) 25 antes de usar.
2) puso los reactivo de ELISA de nuevo al ℃ 2-8 inmediatamente después del uso
3) la reproductibilidad de ELISA en el proceso del análisis es depende en gran parte de la consistencia de la placa que se lava, la operación correcta de la placa que se lava es el punto del programa de la determinación ELISA
4) en todo el proceso de la incubación de la temperatura constante, evite la exposición luminosa, sello el microplate con la membrana de la cubierta.

6. 2 procedimientos de la operación

1) trae el equipo de la prueba al minuto 30 de la temperatura ambiente (℃ 20-25) por lo menos, observa que cada reactivo se debe sacudir uniformemente antes de usar;
2) puso las tiras micro-bien requeridas en marcos de la placa. Reselló el microplate inusitado, almacenado en el ℃ 2-8, no congelado.
3) preparación de la solución: tome el almacenador intermediario concentrado 20× del lavado 15ml, disuelva con agua desionizada en el 1:19 (almacenador intermediario concentrado 20× del lavado de 1 porción + 19 porciones de agua desionizada), o prepárese como cantidad necesaria.
4) enumeración: número los micro-pozos según muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar se deben realizar dos veces; registre sus posiciones.
5) añade estándar/la muestra: Añada el µL 50 de la muestra o la solución estándar en pozos duplicados separados, después añada la conjugación de la enzima, 50 µL/well; entonces solución de funcionamiento del anticuerpo, 50 µL/well. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, sello el microplate con la membrana de la cubierta, incube el °C at25 para el minuto 30 en la oscuridad.
6) microplate del lavado: Abra cuidadosamente el membrance de la cubierta, vierten el líquido fuera de microwell; añada 250 µL/well del almacenador intermediario del lavado, lávese completamente por 4-5 veces, 15-30 s cada vez, después saque y agite para secarse con el papel absorbente. (Utilice la lanza inusitada para perforar la burbuja después de seco)
7) coloración: añada el µL 50 de la solución del substrato A entonces solución de 50 µL B en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, °C del andincubate at25 para 15minin la oscuridad para la coloración.
8) determinación: añada 50 que el µL del para la solución en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente. Fije la longitud de onda del lector del microplate en 450 nanómetro para determinar el valor del OD de cada pozo. (Recomiende leer el valor del OD en la dual-longitud de onda 450/630 nanómetro en el plazo del minuto 5).

7. Juicio del resultado

Hay dos métodos para juzgar los resultados; primer es el juicio áspero, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa. Nota que el valor del OD de la muestra tiene una correlación negativa con el Trichothecenes (T-2) en la muestra
7,1 determinación cualitativa
La gama de concentración (ppb) puede ser obtenida por comparado el valor medio de la absorción con estándares. Suponga que valor de la absorción de la muestra una es 0,3, la muestra dos es 1,0, y los estándares son: 0ppb de 2,243; 0.05ppb de 1,816; 0.15ppb de 1,415; 0.45ppb de 0,74; 1.35ppb de 0,313; 4.05ppb de 0,155. Entonces la concentración de la muestra una está en el rango de 1.35ppb ~ 4.05ppb; La muestra dos es 0.15ppb ~ 0.45ppb. La gama de concentración de Trichothecenes (T-2) en las muestras puede ser obtenida por multiplicado por el dilución correspondiente de la muestra.
7. análisis cuantitativo 2
Para calcular la concentración de muestras, una curva estándar debe ser hecha. Antes de que se haga la curva estándar, el concepto de % de la absorción debe ser saber.
Cálculo de % de la absorción:

Valor del OD de la media de B-the de la muestra o de la solución estándar
Valor del OD de la media de B0-the de las 0 soluciones estándar de ng/mL
El estándar cero así se hace igual hasta el 100% y los valores de la absorción se citan en porcentajes. Los valores calculaban para los estándares se entran en un sistema de coordenadas en el papel cuadriculado semilogarithmic contra el concentración de Trichothecenes (T-2) [ng/mL]. La concentración de Trichothecenes (T-2) en ng/mL correspondiente a la absorción de cada muestra se puede leer en la curva de calibración.
Un software especial para el análisis del resultado de ELISA facilitará determinaciones dobles o múltiples. Si usted necesita, llame por favor para pedir.

8. Precauciones
1) la temperatura ambiente debajo del ℃ 25 o la temperatura de los reactivo y de las muestras que no son vueltos a la temperatura ambiente (℃ 20-25) llevará a un valor estándar más bajo del OD.
2) la sequedad del microplate en el proceso que se lava será acompañada por las situaciones incluyendo las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable; Continúe tan al paso siguiente inmediatamente después del lavado.
3) mezcla uniformemente antes de añadir cualesquiera reactivo.
4) la solución de la parada es la solución ácida sulfúrica de 2 M, evita entrar en contacto con con la piel.
5) no utiliza el equipo que excede su fecha de vencimiento. El uso de reactivo diluidos o adulterados de los equipos llevará a los cambios en la sensibilidad y los valores de detección del OD. No intercambie los reactivo de los equipos de diversos números de lote para utilizar.
6) almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado. Ponga el microplate inusitado en un bolso del auto-lacre para resellarlo. La sustancia estándar y el color descolorido anteriores es sensibles a la luz, y no pueden ser expuestos así directamente a la luz.
7) desecha la solución de la coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución. El valor de detección (450/630nm) de las 0 soluciones estándar (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0> 8) la temperatura óptima de la reacción es 25℃, y las temperaturas demasiado altas o demasiado bajas darán lugar a los cambios en la sensibilidad de detección y valores del OD.

9. Fecha del almacenamiento y de vencimiento
Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.
Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.
Nota: Si el envasado al vacío del microplate tiene salida, es todavía válido utilizar, no afecta al resultado de la prueba, sea relajarse para utilizar.

Q1: ¿Cuánto tiempo tomará para que usted envíe?
A1: Generalmente naves en el plazo de 7 días laborables.

Q2: ¿Usted apoya OEM/ODM?
A2: puede ser apoyado. Podemos modificar para requisitos particulares según sus necesidades específicas y cantidades específicas.

Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Tenemos certificación ISO9001 e ISO13485 la certificación, hasta ahora todo el proceso de producción, tenemos reglas estándar, cumplimos con el comportamiento y las leyes relevantes del gobierno.

Q4: ¿Garantizan al servicio post-venta?
A4: Proporcionamos el servicio post-venta técnico en línea profesional. Si el producto falla durante el experimento, podemos proporcionar
dirección una por a través del teléfono, del vídeo y de otras formas.

Q5: ¿Cuál es su cantidad de orden mínima?
A5: 1Kit.

Q6: ¿Cuál es el método de envío?
A6: Puede ser enviado por expreso (FEDEX, UPS, DHL, el ccsme, etc.) o por el aire y la tierra. Confirme por favor con nosotros antes de poner una orden.