tejido 96 Wells/equipo del maíz de Elisa Mycotoxin Testing Kits For del cacahuete de las aflatoxinas 30min

Aflatoxinas totales ELISA Test Kit para el tejido 96 Wells/equipo del cacahuete del maíz de la alimentación

1. Principio de prueba de los equipos de la micotoxina

Este equipo se basa en el immunoensayo competitivo indirecto de la enzima para la detección de aflatoxinas totales. Los antígenos conjugados se cubren primero en tiras del microwell. La aflatoxina en la muestra compite con el antígeno conjugado cubierto primero en la tira del microwell para los anticuerpos de la anti-aflatoxina. Después de que se añada la conjugación de la enzima, el substrato de TMB se añade para manchar. El valor de la densidad óptica (OD) de una muestra se correlaciona negativamente con la aflatoxina en la muestra. Este valor se compara a una curva estándar, y el nivel residual de la aflatoxina entonces se obtiene.

2. Especificaciones técnicas

Sensibilidad: 0,02 ppb
Temperatura de la incubadora: 25℃
Tiempo de la cultura: 30min~15min
Límite de detección:
Alimentación, arroz, maíz, cacahuete, tejido, aceite de mesa 2ppb
Tarifa de la reacción cruzada:
Aflatoxina B1 100%
Aflatoxina M1 91,2%
Aflatoxina B2 68,4%
Aflatoxina G1 4,7%
Aflatoxina G2 2,7%
Tarifa de recuperación:
Alimentación, arroz, maíz, cacahuete, tejido, aceite de mesa el 95±35%

3. Componentes de prueba de los equipos de la micotoxina

4. Preparación de la muestra

Instrucciones para el uso (los puntos siguientes deben ser ocupados antes del preprocesar)
1) el experimento puede utilizar solamente extremidades disponibles, y las extremidades deben ser substituidas al aspirar diversos reactivo;
2) antes del experimento, cada utensilio experimental se debe limpiar y re-limpiar en caso de necesidad para evitar la contaminación que interfiere con los resultados experimentales.

Preparación de la solución antes del tratamiento previo de la muestra:
1) solución de la disolución de la muestra
Utilice 1 porción 20X concentró la redisolución de la solución y disolver con 19 porciones desionizó el agua para obtener una muestra lista para utilizar que redisolvía la solución.
2) extracto de muestra
Utilice 7 porciones de metanol y disuelva en 3 porciones desionizó el agua para un extracto de muestra listo para utilizar.

Preparación de la muestra
4,1 preparación de las muestras del tejido, de la alimentación, del arroz y del maíz
1) puso 1.0±0.05g de la muestra de tierra en un tubo de centrífuga 50ml, añade 5ml del extracto de muestra, sacudida para 3min, centrifugadora en 20°C para 10min sobre 4000r/min;
2) toma el sobrenadante 100ul, añade la muestra 700ul que redisuelve la solución, sacude bien;
3) toma 50μl para la prueba
Factor del dilución: 40

4,2 preparación de las muestras del aceite de mesa
1) recoge a 1.0±0.05g la muestra del aceite de mesa en un tubo de centrífuga 50ml; añada 5ml del extracto de muestra, después añada 4ml del n-hexano, sacudida para 3min, centrifugadora en 4000r/min en 20℃ para 10min;
2) el descarte el sobrenadante, toma 100ul de la solución media de la capa, añade 700ul de la muestra que redisuelve la solución, y sacude bien;
3) toma 50μl para la prueba
Factor del dilución: 40

4,3 preparación de las muestras del cacahuete
1) el cacahuete puesto 1.0±0.05g machacó la muestra en un tubo de centrífuga 50ml; añada 5ml del extracto de muestra, después añada 4ml del n-hexano, sacudida para 3min, centrifugadora en 4000r/min sobre 20℃ para 10min;
2) el descarte el sobrenadante, toma 100ul de la solución media de la capa, añade 400ul de la muestra que redisuelve la solución, y sacude bien;
3) toma 50μl para la prueba
Factor del dilución: 25

5. Procedimientos de ELISA

5,1 instrucciones para el uso
1) trae los reactivo de ELISA a la temperatura ambiente (20 - el °C) 25 antes de usar.
2) puso el reactivo de ELISA de nuevo a 2-8°C inmediatamente después del uso.
3) la reproductibilidad del proceso del análisis de ELISA depende en gran parte de la consistencia del lavado de la placa, y la operación correcta del lavado de la placa es el foco de determinar el procedimiento de ELISA.
4) durante todos los procesos de la incubación de la temperatura constante, evite la luz, y selle el microplate con una película de la cubierta.

5,2 procedimientos de la operación
1) trae el equipo de la prueba al minuto 30 de la temperatura ambiente (℃ 20-25) por lo menos, observa que cada reactivo se debe sacudir uniformemente antes de usar;
2) puso las tiras micro-bien requeridas en marcos de la placa. Reselló el microplate inusitado, almacenado en el ℃ 2-8, no congelado.
3) preparación de la solución: tome el almacenador intermediario concentrado 20× del lavado 40ml, disuelva con agua desionizada en el 1:19 (almacenador intermediario concentrado 20× del lavado de 1 porción + 19 porciones de agua desionizada), o prepárese como cantidad necesaria.
4) enumeración: número los micro-pozos según muestras y la solución estándar; cada muestra y solución estándar se deben realizar dos veces; registre sus posiciones.
5) añade estándar/la muestra: Añada el µL 50 de la muestra o la solución estándar en pozos duplicados separados, después añada la conjugación de la enzima, 50 µL/well; entonces solución de funcionamiento del anticuerpo, 50 µL/well. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, sello el microplate con la membrana de la cubierta, incube en 25°C para el minuto 30 en la oscuridad.
6) microplate del lavado: Abra cuidadosamente el membrance de la cubierta, vierten el líquido fuera de microwell; añada 250 µL/well del almacenador intermediario del lavado, lávese completamente por 4-5 veces, 15-30 s cada vez, después saque y agite para secarse con el papel absorbente. (Utilice la lanza inusitada para perforar la burbuja después de seco)
7) coloración: añada el µL 50 de la solución del substrato A entonces solución de 50 µL B en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente, andincubate en 25°C para 15min en la oscuridad para la coloración.
8) determinación: añada 50 que el µL del para la solución en cada pozo. Mézclese suavemente sacudiendo la placa manualmente. Fije la longitud de onda del lector del microplate en 450 nanómetro para determinar el valor del OD de cada pozo. (Recomiende leer el valor del OD en la dual-longitud de onda 450/630 nanómetro en el plazo del minuto 5).

6. Juicio del resultado

Hay dos métodos para juzgar los resultados; primer es el juicio áspero, mientras que el segundo es la determinación cuantitativa. Nota que el valor del OD de la muestra tiene una correlación negativa con la aflatoxina total en la muestra.

6,1 determinación cualitativa
La gama de concentración (ppb) puede ser obtenida por comparado el valor medio de la absorción con estándares. Suponga que valor de la absorción de la muestra una es 0,3, la muestra dos es 1,0, y los estándares son: 0ppb de 2,243; 0.02ppb de 1,816; 0.06ppb de 1,415; 0.18ppb de 0,74; 0.54ppb de 0,313; 1.62ppb de 0,155. Entonces la concentración de la muestra una está en el rango de 0.54ppb ~ 1.62ppb; La muestra dos es 0.06ppb ~ 0.18ppb. La gama de concentración de aflatoxina total en las muestras puede ser obtenida por multiplicado por el dilución correspondiente de la muestra.

6. Análisis cuantitativo 2
Para calcular la concentración de muestras, una curva estándar debe ser hecha. Antes de que se haga la curva estándar, el concepto de % de la absorción debe ser saber.
Cálculo de % de la absorción:

Valor del OD de la media de B-the de la muestra o de la solución estándar.
Valor del OD de la media de B0-the de las 0 soluciones estándar de ng/mL.
El estándar cero así se hace igual hasta el 100% y los valores de la absorción se citan en porcentajes. Los valores calculaban para los estándares se entran en un sistema de coordenadas en el papel cuadriculado semilogarithmic contra el concentración total de la aflatoxina [ng/L]. La concentración total de la aflatoxina en ng/L (ppb) correspondiente a la absorción de cada muestra se puede leer en la curva de calibración.
Un software especial para el análisis del resultado de ELISA facilitará determinaciones dobles o múltiples. Si usted necesita, llame por favor para pedir.

7. Precauciones

1) la temperatura ambiente debajo del ℃ 25 o la temperatura de los reactivo y de las muestras que no son vueltos a la temperatura ambiente (℃ 20-25) llevará a un valor estándar más bajo del OD.
2) la sequedad del microplate en el proceso que se lava será acompañada por las situaciones incluyendo las curvas estándar no lineales y la reproductibilidad indeseable; Continúe tan al paso siguiente inmediatamente después del lavado.
3) mezcla uniformemente antes de añadir cualesquiera reactivo.
4) la solución de la parada es la solución ácida sulfúrica de 2 M, evita entrar en contacto con con la piel.
5) no utiliza el equipo que excede su fecha de vencimiento. El uso de reactivo diluidos o adulterados de los equipos llevará a los cambios en la sensibilidad y los valores de detección del OD. No intercambie los reactivo de los equipos de diversos números de lote para utilizar.
6) almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado. Ponga el microplate inusitado en un bolso del auto-lacre para resellarlo. La sustancia estándar y el color descolorido anteriores es sensibles a la luz, y no pueden ser expuestos así directamente a la luz.
7) desecha la solución de la coloración con cualquier color que indique la degeneración de esta solución. El valor de detección (450/630nm) de las 0 soluciones estándar (0 ppb) de menos de 0,5 ((A450nm<0> 8) la temperatura óptima de la reacción es el ℃ 25, y las temperaturas demasiado altas o demasiado bajas darán lugar a los cambios en la sensibilidad de detección y valores del OD.

8. Fecha del almacenamiento y de vencimiento

Almacenamiento: tienda en el ℃ 2-8, no congelado.
Fecha de vencimiento: 12 meses; la fecha de la producción está en la caja.
Nota: Si el envasado al vacío del microplate tiene salida, es todavía válido utilizar, no afecta al resultado de la prueba, sea relajarse para utilizar.

Q1: ¿Cuándo será enviado?
A1: Enviaremos las mercancías para usted cuanto antes en el plazo de 7 días laborables después de recibir el pago. (En caso de factores externos tales como la epidemia, la entrega puede ser retrasada)

Q2: ¿Apoya OEM/ODM?
A2: Puede ser apoyado, pero la cantidad específica necesita ser más de 100.000 pedazos, que es conveniente para los productos modificados para requisitos particulares.

Q3: ¿Cómo su fábrica está haciendo en términos de control de calidad?
A3: Nacionalmente hemos certificado ISO9001 e ISO13485. Nuestro proceso de producción se ajusta a los procedimientos estándar para asegurar calidad del producto óptima.

Q4: ¿Cómo proporcionar el servicio post-venta?
A4: Proporcionamos el servicio post-venta técnico en línea profesional. Podemos proveer de usted la dirección unívoca vía el vídeo, el teléfono, el etc.

Q5: ¿Cuál es la forma de pago?
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Q6: ¿Cómo enviar?
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