• Preparar los reactivos: diluir 1 volumen de tampón de lavado concentrado (20×) con 19 volúmenes de agua destilada, mezclar bien.
• Añadir muestras: abra la bolsa de papel y retire la microplaca. Configure 1 pozo como control en blanco, 2 pozos como control negativo, 2 pozos como control positivo.distribuir 50μL de muestra o control negativo o control positivo a los pozos respectivosVibra suavemente el plato.
• Incubar: Cubrir la microplaca con una cubierta de placa e incubar la microplaca recubierta en un baño de agua o en una incubadora de microplacas controlada por termostato a 37 °C durante 60 minutos.
• Lavar el plato: quitar la cubierta del plato. aspirar el contenido de todos los pozos. Llenar los pozos con el tampón de lavado diluido (10 ~ 20 segundos para remojar) y luego aspirar de nuevo.Repita el procedimiento 5 veces.Asegúrese de que el volumen de reposo es mínimo, golpeando la placa sobre el papel absorbente.
• Añadir conjugado: añadir 100 μL de conjugado a cada pozo (excepto el pozo en blanco).
• Incubar: Cubrir la microplaca e incubar la placa a 37°C durante 30 minutos.
• Lavar el plato: repetir el procedimiento de lavado como en el paso 4.
• Añadir sustrato: añadir 50 μl de solución de sustrato A y 50 μl de solución de sustrato B a cada pozo, mezclar bien, cubrir y incubar a 37 °C durante 30 minutos.
• Reacción de detención: añadir 50 μl de solución de detención a cada pozo, mezclar bien.
• Se leerá la absorbancia a 450 nm. Si se utiliza una medición de doble longitud de onda, se seleccionará la longitud de onda de referencia entre 620 nm y 690 nm.

Las precauciones

• Antes de usar, dejar que todos los componentes del kit alcancen la temperatura ambiente.
• Sigue la instrucción para controlar estrictamente la temperatura y el tiempo de reacción.
• No mezcle componentes de diferentes números de lote para su uso.
• No utilice los componentes del kit después de su fecha de caducidad.