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Ser humano modificado para requisitos particulares un Disintegrin y
una metaloproteinasa con el equipo del análisis de los adornos 19
ELISA de Thrombospondin
Cat.No E3489Hu
Gama estándar de la curva: 0.2ng/ml - 60ng/ml
Sensibilidad: 0.11ng/ml
Tamaño: 96 pozos
Almacenamiento: Almacene los reactivo en 2-8°C. para el almacenamiento de seis
meses excesivo refieren a la fecha de caducidad lo guardan en los
ciclos repetidos Avoid del deshielo de -20°C. Si se abren los
reactivo individuales se recomienda que el equipo esté utilizado en
el plazo de 1 mes.
el producto de los *This está para el uso de la investigación
solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es
recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes de
usar.
Reactivo proporcionado
Componentes | Cantidad |
Solución estándar (64ng/ml) | 0.5ml x1 |
Placa cubierta primero de ELISA | 12 * 8 tiras bien x1 |
Diluyente estándar | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare la solución | 6ml x1 |
Solución A del substrato | 6ml x1 |
Solución B del substrato | 6ml x1 |
Concentrado del almacenador intermediario del lavado (25x) | 20ml x1 |
Anticuerpo humano ADAMTS19 de Biotinylated | 1ml x1 |
Instrucción del usuario | 1 |
Sellador de la placa | 2 imágenes |
Bolso de la cremallera | 1 imagen |
Material requerido pero no suministrado
Precisión
La precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis)
tres muestras de concentración sabida fue probada en una placa para
evaluar la precisión del intra-análisis.
La precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis) tres
muestras de concentración sabida fue probada en análisis separados
para evaluar la precisión del inter-análisis.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-análisis: Inter-análisis<8> del CV: CV<10>
Principio del análisis
Este equipo del análisis del elisa es un análisis
Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto
primero con el anticuerpo humano ADAMTS19. ADAMTS19 presentan en la
muestra se añaden y atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos.
Y el anticuerpo humano entonces biotinylated ADAMTS19 se añade y
ata a ADAMTS19 en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y
ata al anticuerpo de Biotinylated ADAMTS19. Después de la
incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que
se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se
convierte en proporción a la cantidad de ADAMTS19 humano. La
reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la
absorción se mide en 450 nanómetro.
Colección de espécimen
El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura
ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.
El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante.
Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C
en el plazo de 30 minutos de la colección.
La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y
cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos
antedichos.
El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes.
Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja
los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro
de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de
la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1
million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo
repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores.
Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
El tejido y otros fluídos corporales aclaran tejidos en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a
fondo y para pesar antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4)
con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o
congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos.
Observe
el *Sample no se puede diluir con este equipo. Debido el material
utilizamos para preparar el equipo, la interferencia de matriz de
la muestra puede presionar falso la especificidad y la exactitud
del análisis.
Resumen
1. prepare todos los reactivo, muestras y estándares.
2. añada la muestra y el reactivo de ELISA en cada uno bien. Incube
para 1 hora en 37°C.
3. lave la placa 5 veces.
4. añada la solución A y B. Incubate del substrato por 10 minutos
en 37°C.
5. añada paran la solución y el color se convierte.
6. lea el valor del OD en el plazo de 10 minutos.
Cálculo del resultado
Construya una curva estándar trazando el OD medio para cada uno
estándar en (y) el eje vertical contra la concentración en (x) el
eje horizontal y dibuje una curva del mejor ajuste a través de los
puntos en el gráfico. Estos cálculos se pueden realizar mejor con
software computarizado de la curva-colocación y la línea del mejor
ajuste se puede determinar por análisis de regresión.