Alto reforzador sensible del conector del equipo de CNKSR1 ELISA del supresor de la cinasa de Ras 1

Número de modelo:Cat.No E6627Hu
Lugar del origen:Shanghai, China
Cantidad de orden mínima:negociación
Capacidad de la fuente:Western union, T/T
Plazo de expedición:1-3 días laborales, pedido en bloque en el plazo de una semana
Detalles de empaquetado:Envuelto con el paquete de la bolsa de hielo y de la espuma de poliestireno
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Shanghai Shanghai China
Dirección: Edificio internacional de #1008.Junjiang. 228 Ningguo Rd. Yangpu Dist. Shangai. 200090. China
Proveedor Último login veces: Dentro de 34 Horas
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Detalles del producto

Alto reforzador sensible humano del conector del equipo de CNKSR1 ELISA del supresor de la cinasa de Ras 1 equipo del análisis de ELISA
 
Cat.No E6627Hu
 
Precauciones

  • Antes de uso, el equipo y la muestra del bocadillo ELISA se deben calentar naturalmente a la temperatura ambiente 30 minutos.
  • Esta instrucción se debe seguir estrictamente en el experimento.
  • Una vez que el número deseado de tiras se ha quitado, reselle inmediatamente el bolso para proteger el permanecer contra el deterioro. Cubra todos los reactivo cuando es parado.
  • Make sure que mide con una pipeta orden y el índice de adición de bien-a-bien al medir con una pipeta los reactivo.
  • La pipeta inclina y el sellador de la placa a disposición debe estar limpio y disponible evitar la contaminación cruzada.
  • Evite usar los reactivo de diversos lotes juntos.
  • La solución B del substrato es sensible a la luz, no expone la solución B del substrato para encenderse durante mucho tiempo.
  • Pare la solución contiene el ácido. Lleve por favor la protección del ojo, de la mano y de piel al usar este material. Evite el contacto de la piel o de las membranas mucosas con el reactivo del equipo.
  • El equipo no se debe utilizar más allá de la fecha de caducidad.

 
Precisión
La precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en una placa para evaluar la precisión del intra-análisis.
La precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en análisis separados para evaluar la precisión del inter-análisis.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-análisis: CV<8>
Inter-análisis: CV<10>
 
Principio del análisis
Este equipo del bocadillo ELISA es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo humano CNKSR1. CNKSR1 presentan en la muestra se añaden y atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo humano entonces biotinylated CNKSR1 se añade y ata a CNKSR1 en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al anticuerpo de Biotinylated CNKSR1. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad de CNKSR1 humano. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.
 
Uso previsto
Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa exacta de reforzador humano del conector del supresor de la cinasa de Ras 1 (también conocido como CNKSR1) en el suero, plasma, supernates del cultivo celular, lysates de la célula, homogenados del tejido.
 
Reactivo proporcionado

ComponentesCantidad
Solución estándar (1600ng/L)0.5ml x1
Placa cubierta primero de ELISA12 * 8 tiras bien x1
Diluyente estándar3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare la solución6ml x1
Solución A del substrato6ml x1
Solución B del substrato6ml x1
Concentrado del almacenador intermediario del lavado (25x)20ml x1
Anticuerpo humano CNKSR1 de Biotinylated1ml x1
Instrucción del usuario1
Sellador de la placa2 imágenes
Bolso de la cremallera1 imagen

 
 
Colección de espécimen
El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.
 
El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante. Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C en el plazo de 30 minutos de la colección.
 
La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos antedichos.
 
El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1 million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
El tejido y otros fluídos corporales aclaran tejidos en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y para pesar antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4) con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
el *Sample no se puede diluir con este equipo. Debido el material utilizamos para preparar el equipo, la interferencia de matriz de la muestra puede presionar falso la especificidad y la exactitud del análisis.
 
Procedimiento de análisis
1. Prepare todos los reactivo, soluciones estándar y muestras según lo dado instrucciones. Traiga todos los reactivo a la temperatura ambiente antes de usar. El análisis se realiza en la temperatura ambiente.
2. Determine el número de tiras requeridas para el análisis. Inserte las tiras en los marcos para el uso. Las tiras inusitadas se deben almacenar en 2-8°C.
3. Añada el estándar 50μl al estándar bien. Nota: No añada el anticuerpo al estándar bien porque la solución estándar contiene el anticuerpo biotinylated.
4. Añada la muestra 40μl a los pozos de la muestra y entonces añada el anticuerpo de 10μl anti-CNKSR1 a los pozos de la muestra, después añada el streptavidin-HRP 50μl a los pozos y a los pozos estándar (pozo de la muestra del control no en blanco). Mézclese bien. Cubra la placa con un sellador. Incube 60 minutos en 37°C.
5. Quite el sellador y lave la placa 5 veces con el almacenador intermediario del lavado. Empape los pozos con por lo menos el almacenador intermediario del lavado de 0,35 ml para 30 segundos a 1 minuto para cada Washington. Para el lavado automatizado, aspire todos los pozos y lave 5 veces con el almacenador intermediario del lavado, sobrellenando mana con el almacenador intermediario del lavado. Borre la placa sobre las toallas de papel o el otro material absorbente.
6. Añada la solución A del substrato 50μl a cada uno pozo y después añada la solución B del substrato 50μl a cada uno bien. Incube la placa cubierta con un nuevo sellador por 10 minutos en 37°C en la oscuridad.
7. Añada 50μl paran la solución a cada uno bien, el color azul cambiará en amarillo inmediatamente.
8. Determine la densidad óptica (valor del OD) de cada uno pozo inmediatamente usando un sistema del lector del microplate a 450 nanómetro dentro de 10 minués después de añadir la solución de la parada.

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