Sensibilidad fuerte humana modificada para requisitos particulares del músculo PFKM de Phosphofructokinase del equipo de ELISA
Número de modelo:Cat.No E6646Hu
Lugar del origen:Shanghai, China
Cantidad de orden mínima:negociación
Capacidad de la fuente:Western union, T/T
Plazo de expedición:1-3 días laborales, pedido en bloque en el plazo de una semana
Detalles de empaquetado:Envuelto con el paquete de la bolsa de hielo y de la espuma de poliestireno
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Shanghai Shanghai China
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Edificio internacional de #1008.Junjiang. 228 Ningguo Rd. Yangpu Dist. Shangai. 200090. China
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Detalles del producto
Equipo fuerte humano de la prueba del equipo PFKM ELISA del
análisis del músculo ELISA de Phosphofructokinase de la
sensibilidad modificado para requisitos particulares
Cat.No E6646Hu
Preparación el reactivo
Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes
de usar.
El estándar reconstituye el 120μl del estándar (80ng/ml) con 120μl del
diluyente estándar para generar una solución común estándar
40ng/ml. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la
agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos
estándar duplicados en serie diluyendo el 1:2 estándar de la
solución común (40ng/ml) con diluyente estándar para producir las
soluciones 20ng/ml, 10ng/ml, 5ng/ml y 2.5ng/ml. El diluyente
estándar sirve como el estándar cero (0 ng/ml). Cualquier solución
restante se debe congelar en -20°C y utilizar en el plazo de un
mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como
sigue:
| 40ng/ml | No.5 estándar | diluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl |
| 20ng/ml | No.4 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl |
| 10ng/ml | No.3 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl |
| 5ng/ml | No.2 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl |
| 2.5ng/ml | No.1 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl |
| Concentración estándar | No.5 estándar | No.4 estándar | No.3 estándar | No.2 estándar | No.1 estándar |
| 80ng/ml | 40ng/ml | 20ng/ml | 10ng/ml | 5ng/ml | 2.5ng/ml |
Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 25x del almacenador intermediario del lavado en
desionizado o agua destilada para rendir 500 ml de almacenador
intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el
concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan
disuelto totalmente.
Procedimiento de análisis
1. Prepare todos los reactivo, soluciones estándar y muestras según lo
dado instrucciones. Traiga todos los reactivo a la temperatura
ambiente antes de usar. El análisis se realiza en la temperatura
ambiente.
2. Determine el número de tiras requeridas para el análisis. Inserte
las tiras en los marcos para el uso. Las tiras inusitadas se deben
almacenar en 2-8°C.
3. Añada el estándar 50μl al estándar bien. Nota: No añada el anticuerpo al estándar bien porque la solución
estándar contiene el anticuerpo biotinylated.
4. Añada la muestra 40μl a los pozos de la muestra y entonces añada el
anticuerpo anti-PFKM 10μl a los pozos de la muestra, después añada
el streptavidin-HRP 50μl a los pozos y a los pozos estándar (pozo
de la muestra del control no en blanco). Mézclese bien. Cubra la
placa con un sellador. Incube 60 minutos en 37°C.
5. Quite el sellador y lave la placa 5 veces con el almacenador
intermediario del lavado. Empape los pozos con por lo menos el
almacenador intermediario del lavado de 0,35 ml para 30 segundos a
1 minuto para cada Washington. Para el lavado automatizado, aspire
todos los pozos y lave 5 veces con el almacenador intermediario del
lavado, sobrellenando mana con el almacenador intermediario del
lavado. Borre la placa sobre las toallas de papel o el otro
material absorbente.
6. Añada la solución A del substrato 50μl a cada uno pozo y después
añada la solución B del substrato 50μl a cada uno bien. Incube la
placa cubierta con un nuevo sellador por 10 minutos en 37°C en la
oscuridad.
7. Añada 50μl paran la solución a cada uno bien, el color azul
cambiará en amarillo inmediatamente.
8. Determine la densidad óptica (valor del OD) de cada uno pozo
inmediatamente usando un sistema del lector del microplate a 450
nanómetro dentro de 10 minués después de añadir la solución de la
parada.
Gama estándar de la curva: 0.2ng/ml - 70ng/ml
Sensibilidad: 0.096ng/ml
Tamaño: 96 pozos
Almacenamiento: Almacene los reactivo en 2-8°C. para el almacenamiento de seis
meses excesivo refieren a la fecha de caducidad lo guardan en los
ciclos repetidos Avoid del deshielo de -20°C. Si se abren los
reactivo individuales se recomienda que el equipo esté utilizado en
el plazo de 1 mes.
el producto de los *This está para el uso de la investigación
solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es
recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes de
usar.
Uso previsto
Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa
exacta de músculo de Phosphofructokinase del ser humano (también
conocido como PFKM) en el suero, plasma, supernates del cultivo
celular, lysates de la célula, homogenados del tejido.
Principio del análisis
Este equipo del análisis de ELISA es un análisis Enzima-ligado del
inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el
anticuerpo humano de PFKM. PFKM presentan en la muestra se añaden y
atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo
humano entonces biotinylated de PFKM se añade y ata a PFKM en la
muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al anticuerpo de
Biotinylated PFKM. Después de la incubación Streptavidin-HRP
desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del
substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a
la cantidad de PFKM humano. La reacción es terminada por la adición
de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.
Colección de espécimen
El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura
ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.
El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante.
Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C
en el plazo de 30 minutos de la colección.
La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y
cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos
antedichos.
El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes.
Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja
los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro
de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de
la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1
million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo
repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores.
Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Tejidos de la aclaración del tejido en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y a pesar
antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4)
con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o
congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos.
el *Sample no se puede diluir con este equipo. Debido el material
utilizamos para preparar el equipo, la interferencia de matriz de
la muestra puede presionar falso la especificidad y la exactitud
del análisis.
Sensibilidad fuerte humana modificada para requisitos particulares del músculo PFKM de Phosphofructokinase del equipo de ELISA
Carro de la investigación
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