Sensibilidad del equipo de Elisa del bocadillo del óxido nítrico altas/precisión 96 Wells

Número de modelo:Cat.No E0439Mo
Lugar del origen:Shanghai, China
Cantidad de orden mínima:negociación
Condiciones de pago:Western union, T/T
Capacidad de la fuente:En stock
Plazo de expedición:1-3 días laborales, pedido en bloque en el plazo de una semana
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Alto equipo del bocadillo ELISA del óxido nítrico del ratón de la sensibilidad y de la precisión de 96 Wells

Cat.No E0439Mo

el producto de los *This está para el uso de la investigación solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes de usar.

 

Uso previsto

Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa exacta de óxido nítrico del ratón (también conocido como NINGÚN) en el suero, plasma, supernates del cultivo celular, lysates de la célula, homogenados del tejido.

 

Principio del análisis

Este equipo es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el ratón NINGÚN anticuerpo. El presente en la muestra se añade y ata NO a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el ratón entonces biotinylated NINGÚN anticuerpo se añade y ata a NO en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y no ata al Biotinylated NINGÚN anticuerpo. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad de ratón NO. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.

 

Reactivo proporcionado

ComponentesCantidad
Solución estándar (480μmol/L)0.5ml x1
Placa cubierta primero de ELISA12 * 8 tiras bien x1
Diluyente estándar3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare la solución6ml x1
Solución A del substrato6ml x1
Solución B del substrato6ml x1
Concentrado del almacenador intermediario del lavado (30x)20ml x1
Ratón de Biotinylated NINGÚN anticuerpo1ml x1
Instrucción del usuario1
Sellador de la placa2 imágenes
Bolso de la cremallera1 imagen

 

Colección de espécimen
El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.
 
El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante. Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C en el plazo de 30 minutos de la colección.
 
La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos antedichos.
 
El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1 million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
Tejidos de la aclaración del tejido en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y a pesar antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4) con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

Observe

  • Las concentraciones de la muestra deben ser predichas antes de ser utilizado en el análisis. Si la concentración de la muestra no está dentro de la gama de la curva estándar, los usuarios deben entrarnos en contacto con para determinar la muestra óptima para sus experimentos particulares.
  • Las muestras que se utilizarán en el plazo de 5 días se deben almacenar en las muestras 2-8°C. se deben aliquoted o se deben almacenar en -20°C en el plazo de 1 mes o -80°C en el plazo de 6 meses. Avoid repitió ciclos hielo-deshielo.
  • Las muestras se deben traer a la temperatura ambiente antes de comenzar el análisis.
  • Centrifugadora para recoger la muestra antes de usar.
  • Las muestras que contienen NaN3 no pueden ser probadas mientras que inhibe la actividad de la peroxidasa (HRP) del rábano picante.
  • Recoja los supernatants cuidadosamente. Cuando los sedimentos ocurrieron durante almacenamiento, la centrifugación se debe realizar otra vez.
  • La hemólisis puede afectar grandemente la validez de los resultados de la prueba. Tome el cuidado para minimizar la hemólisis.

el *Sample no se puede diluir con este equipo. Debido el material utilizamos para preparar el equipo, la interferencia de matriz de la muestra puede presionar falso la especificidad y la exactitud del análisis.

 

Preparación el reactivo

Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes de usar. El estándar reconstituye el 120μl del estándar (480μmol/L) con 120μl del diluyente estándar para generar una solución común estándar 240μmol/L. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos estándar duplicados en serie diluyendo la solución común estándar (240μmol/L) 1:2 con el diluyente estándar para producir las soluciones 120μmol/L, 60μmol/L, 30μmol/L y 15μmol/L. El diluyente estándar sirve como el estándar cero (0 μmol/L). Cualquier solución restante se debe congelar en -20℃ y utilizar en el plazo de un mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:

 

240μmol/LNo.5 estándardiluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl
120μmol/LNo.4 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl
60μmol/LNo.3 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl
30μmol/LNo.2 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl
15μmol/LNo.1 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl

 

Concentración estándarNo.5 estándarNo.4 estándarNo.3 estándarNo.2 estándarNo.1 estándar
480μmol/L240μmol/L120μmol/L60μmol/L30μmol/L15μmol/L

 

Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 30x del almacenador intermediario del lavado en desionizado o agua destilada para rendir 500 ml de almacenador intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan disuelto totalmente.

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Sensibilidad del equipo de Elisa del bocadillo del óxido nítrico altas/precisión 96 Wells

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