Equipo trenzado Anti-doble de la DNA DS-DNA ELISA del ratón de la alta precisión y de la especificidad de 96 Wells

Número de modelo:Cat.No E0139Mo
Lugar del origen:Shanghai, China
Cantidad de orden mínima:negociación
Condiciones de pago:Western union, T/T
Capacidad de la fuente:En stock
Plazo de expedición:1-3 días laborales, pedido en bloque en el plazo de una semana
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Detalles del producto

Equipo trenzado Anti-doble de la DNA DS-DNA ELISA del ratón de la alta precisión y de la especificidad de 96 Wells

Cat.No E0139Mo
Gama estándar de la curva: 0.5ng/ml - 200ng/ml
Sensibilidad: 0.25ng/ml
Tamaño: 96 pozos
el producto de los *This está para el uso de la investigación solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Itis recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes del uso.
 
Precisión
La precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en una placa para evaluar la precisión del intra-análisis.
La precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis) tres muestras de concentración sabida fue probada en análisis separados para evaluar la precisión del inter-análisis.
CV (%) = SD/mean x 100
Intra-análisis: CV<8>
Inter-análisis: CV<10>
 
Principio del análisis
Este equipo es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo del ratón DS-DNA. DS-DNA presentan en la muestra se añaden y atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo entonces biotinylated del ratón DS-DNA se añade y ata a DS-DNA en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al Biotinylated DS-DNAantibody. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad del ratón DS-DNA. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.
 
Reactivo proporcionado

ComponentesCantidad
Solución estándar (240ng/ml)0.5ml x1
Placa cubierta primero de ELISA12 * 8 tiras bien x1
Diluyente estándar3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare la solución6ml x1
Solución A del substrato6ml x1
Solución B del substrato6ml x1
Concentrado del almacenador intermediario del lavado (30x)20ml x1
Anticuerpo del ratón DS-DNA de Biotinylated1ml x1
Instrucción del usuario1
Sellador de la placa2 imágenes
Bolso de la cremallera1 imagen


Material requerido pero no suministrado

  • Incubadora 37°C±0.5°C
  • Papel absorbente
  • Pipetas de la precisión y extremidades disponibles de la pipeta
  • Limpie los tubos
  • Desionizado o agua destilada
  • Lector de Microplate con 450 el filtro de la longitud de onda del ± 10nm

 
Colección de espécimen
El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.
 
El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante. Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C en el plazo de 30 minutos de la colección.
 
La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos antedichos.
 
El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1 million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
Tejidos de la aclaración del tejido en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y a pesar antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4) con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
 
el *Sample no se puede diluir con este equipo. Debido el material utilizamos para preparar el equipo, la interferencia de matriz de la muestra puede presionar falso la especificidad y la exactitud del análisis.
 
Procedimiento de análisis
1. Prepare todos los reactivo, soluciones estándar y muestras según lo dado instrucciones. Traiga todos los reactivo a la temperatura ambiente antes de usar. El análisis se realiza en la temperatura ambiente.
2. Determine el número de tiras requeridas para el análisis. Inserte las tiras en los marcos para el uso. Las tiras inusitadas se deben almacenar en 2-8°C.
3. Añada el estándar 50μl al estándar bien. Nota: No añada el anticuerpo al estándar bien porque la solución estándar contiene el anticuerpo biotinylated.
4. Añada la muestra 40μl a los pozos de la muestra y entonces añada el anticuerpo de la anti-DS-DNA 10μl a los pozos de la muestra, después añada el streptavidin-HRP 50μl a los pozos y a los pozos estándar (pozo de la muestra del control no en blanco). Mézclese bien. Cubra la placa con un sellador. Incube 60 minutos en 37°C.
5. Quite el sellador y lave la placa 5 veces con el almacenador intermediario del lavado. Empape los pozos con por lo menos el almacenador intermediario del lavado de 0,35 ml para 30 segundos a 1 minuto para cada Washington. Para el lavado automatizado, aspire todos los pozos y lave 5 veces con el almacenador intermediario del lavado, sobrellenando mana con el almacenador intermediario del lavado. Borre la placa sobre las toallas de papel o el otro material absorbente.
6. Añada la solución A del substrato 50μl a cada uno pozo y después añada la solución B del substrato 50μl a cada uno bien. Incube la placa cubierta con un nuevo sellador por 10 minutos en 37°C en la oscuridad.
7. Añada 50μl paran la solución a cada uno bien, el color azul cambiará en amarillo inmediatamente.
8. Determine la densidad óptica (valor del OD) de cada uno pozo inmediatamente usando un sistema del lector del microplate a 450 nanómetro dentro de 10 minués después de añadir la solución de la parada.
 
Resumen
1. Prepare todos los reactivo, muestras y estándares.
2. Añada la muestra y el reactivo de ELISA en cada uno bien. Incube para 1 hora en 37°C.
3. Lave la placa 5 veces.
4. Añada la solución A y B. Incubate del substrato por 10 minutos en 37°C.
5. Añada paran la solución y el color se convierte.
6. Lea el valor del OD en el plazo de 10 minutos.
 
Cálculo del resultado
Construya una curva estándar trazando el OD medio para cada uno estándar en (y) el eje vertical contra la concentración en (x) el eje horizontal y dibuje una curva del mejor ajuste a través de los puntos en el gráfico. Estos cálculos se pueden realizar mejor con software computarizado de la curva-colocación y la línea del mejor ajuste se puede determinar por análisis de regresión.

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