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Interleukin bovino 1 (IL-1 beta) equipo beta de ELISA
Cat.No E0197Bo
Gama estándar de la curva: 0.5ng/L - 200ng/L
Sensibilidad: 0.25ng/L
Tamaño: 96 pozos
Almacenamiento: Almacene los reactivo en 2-8°C. para el almacenamiento de seis
meses excesivo refieren a la fecha de caducidad lo guardan en los
ciclos repetidos Avoid del deshielo de -20°C. Si se abren los
reactivo individuales se recomienda que el equipo esté utilizado en
el plazo de 1 mes.
* este producto está para el uso de la investigación solamente, no
para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es recomienda
altamente leer esta instrucción totalmente antes de usar.
Uso previsto
Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa
exacta del Interleukin bovino 1 beta (también conocido como IL-1B)
en el suero, plasma, supernates del cultivo celular, lysates de la
célula, homogenados del tejido.
Principio del análisis
Este equipo es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente
(ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo bovino
de IL-1B. IL-1B presentan en la muestra se añaden y atan a los
anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo bovino entonces
biotinylated de IL-1B se añade y ata a IL-1B en la muestra. Después
Streptavidin-HRP se añade y ata al Biotinylated IL-1Bantibody.
Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante
un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y
el color se convierte en proporción a la cantidad de IL-1B bovino.
La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y
la absorción se mide en 450 nanómetro.
Reactivo proporcionado
Componentes | Cantidad |
Solución estándar (240ng/L) | 0.5ml x1 |
Placa cubierta primero de ELISA | 12 * 8 tiras bien x1 |
Diluyente estándar | 3ml x1 |
Streptavidin-HRP | 6ml x1 |
Pare la solución | 6ml x1 |
Solución A del substrato | 6ml x1 |
Solución B del substrato | 6ml x1 |
Concentrado del almacenador intermediario del lavado (30x) | 20ml x1 |
Anticuerpo bovino de Biotinylated IL-1B | 1ml x1 |
Instrucción del usuario | 1 |
Sellador de la placa | 2 imágenes |
Bolso de la cremallera | 1 imagen |
Colección de espécimen
El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura
ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.
El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante.
Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C
en el plazo de 30 minutos de la colección.
La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y
cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos
antedichos.
El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes.
Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja
los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro
de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de
la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1
million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo
repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores.
Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.
Tejidos de la aclaración del tejido en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y a pesar
antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4)
con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o
congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por
aproximadamente 20 minutos.
Preparación el reactivo
Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes
de usar.
El estándar reconstituye el 120μl del estándar (240ng/L) con 120μl del
diluyente estándar para generar una solución común estándar
120ng/L. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la
agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos
estándar duplicados en serie diluyendo la solución común estándar
(120ng/L) 1:2 con el diluyente estándar para producir las
soluciones 60ng/L, 30ng/L, 15ng/L y 7.5ng/L. El diluyente estándar
sirve como el estándar cero (0 ng/L). Cualquier solución restante
se debe congelar en -20°C y utilizar en el plazo de un mes. El
dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:
120ng/L | No.5 estándar | diluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl |
60ng/L | No.4 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl |
30ng/L | No.3 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl |
15ng/L | No.2 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl |
7.5ng/L | No.1 estándar | 120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl |
Concentración estándar | No.5 estándar | No.4 estándar | No.3 estándar | No.2 estándar | No.1 estándar |
240ng/L | 120ng/L | 60ng/L | 30ng/L | 15ng/L | 7.5ng/L |
Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 30x del almacenador intermediario del lavado en
desionizado o agua destilada para rendir 500 ml de almacenador
intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el
concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan
disuelto totalmente.
Referencias
“Red inmune veterinaria el reactivo de los E.E.U.U.: secuencias
bovinas expresadas del gen.”
U.S. Red inmune veterinaria Hudgens T., Tompkins D., Baldwin C.L. el reactivo.
Sometido (NOV-2007) a las bases de datos de EMBL/GenBank/DDBJ