Alto Specifibility canino Osteocalcin ELISA Kit con el anticuerpo canino de OT

Brand Name:BT Lab
Certification:CE, ISO9001:2005, MSDS
Model Number:Cat.No E0146Ca
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Detalles del producto

Equipo canino de Osteocalcin ELISA con alto Spesificity y sensibilidad 

Cat.No E0146Ca

 

Principio del análisis

Este equipo es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo canino de OT. OT presentan en la muestra se añaden y atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo canino entonces biotinylated de OT se añade y ata a OT en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al anticuerpo de Biotinylated OT. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad de OT canino. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.

 

Reactivo proporcionado

ComponentesCantidad

Solución estándar (24ng/ml)

0.5ml x1
Placa cubierta primero de ELISA12 * 8 tiras bien x1
Diluyente estándar3ml x1
Streptavidin-HRP6ml x1
Pare la solución6ml x1
Solución A del substrato6ml x1
Solución B del substrato6ml x1
Concentrado del almacenador intermediario del lavado (30x)20ml x1
Anticuerpo canino de Biotinylated OT1ml x1
Instrucción del usuario1
Sellador de la placa2 imágenes
Bolso de la cremallera1 imagen

 

Colección de espécimen

El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.

 

El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante. Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C en el plazo de 30 minutos de la colección.

 

La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos antedichos.

 

El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1 million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

Tejidos de la aclaración del tejido en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y a pesar antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4) con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

Preparación el reactivo

Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes de usar.

El estándar reconstituye el 120μl del estándar (24ng/ml) con 120μl del diluyente estándar para generar una solución común estándar 12ng/ml. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos estándar duplicados en serie diluyendo el 1:2 estándar de la solución común (12ng/ml) con diluyente estándar para producir las soluciones 6ng/ml, 3ng/ml, 1.5ng/ml y 0.75ng/ml. El diluyente estándar sirve como el estándar cero (0 ng/ml). Cualquier solución restante se debe congelar en -20℃ y utilizar en el plazo de un mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:

 

12ng/mlNo.5 estándardiluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl
6ng/mlNo.4 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl
3ng/mlNo.3 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl
1.5ng/mlNo.2 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl
0.75ng/mlNo.1 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl

 

Concentración estándarNo.5 estándarNo.4 estándarNo.3 estándarNo.2 estándarNo.1 estándar
24ng/ml12ng/ml6ng/ml3ng/ml1.5ng/ml0.75ng/ml

 

Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 30x del almacenador intermediario del lavado en desionizado o agua destilada para rendir 500 ml de almacenador intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan disuelto totalmente.

 

Referencias

[1" expresión de alto nivel en Escherichia Coli de la hormona de crecimiento bovina biológicamente activa. “George H.J., L'Italien J.J., Pilacinski W.P., Glassman D.L., Krzyzek R.A.DNA 4:273- 281(1985)

 

 

 

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