IL1 equipo beta del ser humano ELISA para la detección cuantitativa exacta del laboratorio

Número de modelo:Cat.No E0143Hu
Lugar del origen:Shanghai, China
Cantidad de orden mínima:negociación
Capacidad de la fuente:Western union, T/T
Plazo de expedición:1-3 días laborales, pedido en bloque en el plazo de una semana
Detalles de empaquetado:Envuelto con el paquete de la bolsa de hielo y de la espuma de poliestireno
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Shanghai Shanghai China
Dirección: Edificio internacional de #1008.Junjiang. 228 Ningguo Rd. Yangpu Dist. Shangai. 200090. China
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96 equipo fuerte de la especificidad ELISA de los pozos para el equipo humano de IL1B ELISA

 

Uso previsto

Este equipo del bocadillo está para la detección cuantitativa exacta del Interleukin humano 1 beta (también conocido como IL-1B) en el suero, plasma, supernates del cultivo celular, lysates de la célula, homogenados del tejido.

 

Principio del análisis

Este equipo es un análisis Enzima-ligado del inmunosorbente (ELISA). La placa se ha cubierto primero con el anticuerpo humano de IL-1B. IL-1B presentan en la muestra se añaden y atan a los anticuerpos cubiertos en los pozos. Y el anticuerpo humano entonces biotinylated de IL-1B se añade y ata a IL-1B en la muestra. Después Streptavidin-HRP se añade y ata al anticuerpo de Biotinylated IL-1B. Después de la incubación Streptavidin-HRP desatado se quita durante un paso que se lava. La solución del substrato entonces se añade y el color se convierte en proporción a la cantidad de IL-1B humano. La reacción es terminada por la adición de ácido para la solución y la absorción se mide en 450 nanómetro.

 

Colección de espécimen

El suero permite que el suero coagule por 10-20 minutos en la temperatura ambiente. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por 20 minutos.

 

El plasma recoge plasma usando el EDTA o la heparina como anticoagulante. Centrifugue las muestras por 15 minutos en 2000-3000 RPM en 2 - 8°C en el plazo de 30 minutos de la colección.

 

La orina recoge por el tubo estéril. Centrifugadora en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Al recoger el líquido flúido y cerebroespinal pleuroperitoneal, siga por favor los procedimientos antedichos.

 

El sobrenadante del cultivo celular recoge por los tubos estéril al examinar secrete los componentes. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos. Recoja los supernatants cuidadosamente. Al examinar los componentes dentro de la célula, utilice PBS (pH 7.2-7.4) para diluir la suspensión de la célula a la concentración de la célula de aproximadamente 1 million/ml. Dañe las células durante ciclos hielo-deshielo repetidos para dejar hacia fuera los componentes interiores. Centrifugue en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

Tejidos de la aclaración del tejido en PBS (pH 7,4) para quitar exceso de sangre a fondo y a pesar antes de la homogeneización. Pique los tejidos y homogenéicelos en PBS (pH7.4) con un homogeneizador de cristal en el hielo. Deshiele en 2-8°C o congele en la centrifugadora de -20°C. en 2000-3000 RPM por aproximadamente 20 minutos.

 

Observe

  • Las concentraciones de la muestra deben ser predichas antes de ser utilizado en el análisis. Si la concentración de la muestra no está dentro de la gama de la curva estándar, los usuarios deben entrarnos en contacto con para determinar la muestra óptima para sus experimentos particulares.

  • Las muestras que se utilizarán en el plazo de 5 días se deben almacenar en las muestras 2-8°C. se deben aliquoted o se deben almacenar en -20°C en el plazo de 1 mes o -80°C en el plazo de 6 meses. Avoid repitió ciclos hielo-deshielo.

  • Las muestras se deben traer a la temperatura ambiente antes de comenzar el análisis.

  • Centrifugadora para recoger la muestra antes de usar.

  • Las muestras que contienen NaN3 no pueden ser probadas mientras que inhibe la actividad de la peroxidasa (HRP) del rábano picante.

  • Recoja los supernatants cuidadosamente. Cuando los sedimentos ocurrieron durante almacenamiento, la centrifugación se debe realizar otra vez.

* la muestra no se puede diluir con este equipo. Debido el material utilizamos para preparar el equipo, la interferencia de matriz de la muestra puede presionar falso la especificidad y la exactitud del análisis.

 

Preparación el reactivo

Todos los reactivo se deben traer a la temperatura ambiente antes de usar.

El estándar reconstituye el 120μl del estándar (8000pg/L) con 120μl del diluyente estándar para generar una solución común estándar 4000pg/L. Permita que el estándar se siente por 15 minutos con la agitación apacible antes de hacer diluciones. Prepare los puntos estándar duplicados en serie diluyendo la solución común estándar (4000pg/L) 1:2 con el diluyente estándar para producir las soluciones 2000pg/L, 1000pg/L, 500pg/L y 250pg/L. El diluyente estándar sirve como el estándar cero (0 pg/L). Cualquier solución restante se debe congelar en -20°C y utilizar en el plazo de un mes. El dilución de las soluciones estándar sugeridas es como sigue:

 

4000pg/LNo.5 estándardiluyente original del estándar 120μl + del estándar 120μl
2000pg/LNo.4 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.5 + 120μl
1000pg/LNo.3 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.4 + 120μl
500pg/LNo.2 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.3 + 120μl
250pg/LNo.1 estándar120μl estándar diluyente del estándar No.2 + 120μl

 

Concentración estándarNo.5 estándarNo.4 estándarNo.3 estándarNo.2 estándarNo.1 estándar
8000pg/L4000pg/L2000pg/L1000pg/L500pg/L250pg/L

 

Almacenador intermediario 20ml diluído del lavado del concentrado 30x del almacenador intermediario del lavado en desionizado o agua destilada para rendir 500 ml de almacenador intermediario del lavado 1x. Si los cristales han formado en el concentrado, mezcla suavemente hasta que los cristales hayan disuelto totalmente.

 

Cat.No E0143Hu

Gama estándar de la curva: 20pg/L - 6000pg/L

Sensibilidad: 10.07pg/L

Tamaño: 96 pozos

Almacenamiento: Almacene los reactivo en 2-8°C. para el almacenamiento de seis meses excesivo refieren a la fecha de caducidad lo guardan en los ciclos repetidos Avoid del deshielo de -20°C. Si se abren los reactivo individuales se recomienda que el equipo esté utilizado en el plazo de 1 mes.

* este producto está para el uso de la investigación solamente, no para el uso en procedimientos de la diagnosis. Es recomienda altamente leer esta instrucción totalmente antes de usar.

 

Referencias

Moos V., Rudwaleit M., Herzog V., Hohlig K., Sieper J., moleta B.
Rheum de la artritis. 43:2417- 2422(2000)

 
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