Muestra de diagnóstico del plasma de los equipos de la tiroxina T4 Elisa con 2 gamas estándar de la curva

Prueba de la tiroxina T4 ELISA, alta exactitud, método del bocadillo de Elisa, para la medida cuantitativa

Nombre de producto: Prueba de la tiroxina T4 ELISA

Uso previsto:

El equipo de (T4) de la tiroxina se diseña para medir cuantitativo el presente T4 en suero, plasma (EDTA y heparina), orina, muestras fecales secadas extraídas, y culturemedia del tejido. Este equipo mide totalT4 en suero, plasma, y muestras fecales extraídas. T4 es independiente de la especie.

Resumen:

La tiroxina es la hormona principal producida por la glándula tiroides. Las hormonas tiroideas, el triiodothyronine (T3) y la tiroxina (T4), son las hormonas tirosina-basadas producidas por la glándula tiroides que son sobre todo responsables de la regulación del metabolismo. El yodo es necesario para la producción de T3 y de T4. Una deficiencia del yodo lleva a la producción disminuida de T3 y de T4, agranda el tejido de la tiroides y causará la enfermedad conocida como bocio. La forma principal de hormona tiroidea en la sangre es la tiroxina (T4), que tiene una semivida más larga que el T3. El ratio de T4 al T3 lanzado en la sangre es áspero 20 a 1. T4 es convertido al T3 activo (tres a cuatro veces más potente que T4) dentro de las células por los deiodinases (5' - iodinase). Éstos son procesados más a fondo por la descarboxilación y el deiodination para producir el iodothyronamine (T1a) y el thyronamine (T0a). Los tres isoforms de los deiodinases selenio-están conteniendo las enzimas, así el selenio dietético es esencial para la producción T3. El hipotiroidismo es la condición que resulta de la debajo-producción de tiroxina por la glándula tiroides cualquiera porque la glándula es naturalmente underactive o porque la terapia o la cirugía del radioyodo para una glándula activa ha dado lugar a infraactividad. La tiroxina se toma para substituir la deficiencia que existe en tales situaciones y por lo tanto para restaurar actividad metabólica normal. La producción de la hormona tiroidea es regulada vía la modulación pituitaria de (TSH) de la tirotropina de la secreción del prohormone de (T4) de la tiroxina por la glándula tiroides y la regulación de la producción activa de (T3) del triiodothyronine en tejidos periféricos vía los acontecimientos metabólicos que influencian la enzima.

Principio de prueba:

El equipo ofrece 2 gamas estándar de la curva. Para las muestras del suero y del plasma, recomendamos el usar del µL 10 de estándares o de muestras. La gama de concentración del análisis para T4 será a partir 50 ng/ml a 0,781 ng/ml. Para las muestras de orina, recomendamos alternativamente el usar del µL 100 de estándares o muestreamos concentraciones de T4 que se extiendan a partir de 4 ng/ml a 0,0625 ng/ml.

Una solución común T4 se proporciona para generar las curvas estándar para el análisis y todas las muestras se deben leer de la curva estándar. Los estándares o las muestras diluidas se miden con una pipeta en una placa de microtítulo clara cubierta con un anticuerpo para capturar los anticuerpos del ratón. Una conjugación de T4-peroxidase se añade a los estándares y a las muestras en los pozos. La reacción obligatoria es iniciada por la adición de un anticuerpo monoclonal toT4 a cada uno bien. Después de que se lave una incubación de la hora la placa y se añade el substrato. El substrato reacciona con la conjugación encuadernada de T4-peroxidase. Después de que se pare una incubación corta, la reacción y la intensidad del color generado se detecta en un lector de la placa de microtítulo capaz de medir la longitud de onda 450nm. La concentración del T4 en la muestra se calcula, después de hacer la corrección conveniente para el dilución de la muestra, usando el software disponible con la mayoría de los lectores de la placa.

Componentes del equipo

1. Microtiterwells, 12 x 8 (rómpase aparte) tiras, 96 pozos; Wells cubrió con el antígeno de Treponema pálido. (1 tenedor incluyendo de la tira y 1 hoja de la cubierta)
2. *** De Pos. Control, 1 frasco, 1,0 ml, de listo para utilizar; coloreado casquillo amarillo, rojo.
3. Negativo. Controle el ***, 1 frasco, 2,0 ml, de listo para utilizar; coloreado casquillo amarillo, amarillo.
4. *** Del control del atajo, 1 frasco, 1,0 ml, de listo para utilizar; coloreado casquillo amarillo, negro.
5. Conjugación de la enzima **, 1 frasco, 13 ml, de listo para utilizar,
6. Solución del substrato, 1 frasco, 14 ml, de listo para utilizar, Tetramethylbenzidine (TMB).
7. Pare la solución, 1 frasco, 14 ml, de listo para utilizar, contiene 0,2 mol/l H2SO4, evita el contacto con la solución de la parada. Puede causar irritaciones y quemaduras de piel.
8. Solución del lavado *, 1 frasco, 30 ml (20X concentrado para 600 ml), ± 0,2 del pH 7,2 ve la preparación del „de reactivo “.

* contiene el 0.03% ProClin 300

** contiene el 0.03% ProClin sulfato de la gentamicina de 300 del + 0.01%

el *** contiene el 0.03% ProClin 300 el + 0.015% 5 bromo-5-nitro-1,3-dioxane (BND) el + 0.010% 2 methyl-2H-isothiazol-3-one (el MIT)

PROCEDIMIENTO DE ANÁLISIS

Cada uno corrida debe incluir una curva estándar.

1. Asegure el número deseado de pozos del microtítulo en el tenedor del marco.

2. Dispense el µL 10 de cada estándar, control y muestras con nuevas extremidades disponibles en pozos apropiados.

3. Incube por 5 minutos en la temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

4. Dispense la conjugación de la enzima de 100 µL en cada uno bien.

Mézclese a fondo por 10 segundos. Es importante tener una mezcla completa en este paso.

5. Incube por 80 minutos en la temperatura ambiente (18 °C – °C) 25.

6. Sacuda enérgicamente hacia fuera el contenido de los pozos.

Aclare los pozos 5 veces con la solución diluida del lavado (µL 400 por pozo). Pegue los pozos agudamente en el papel absorbente para quitar gotitas residuales.

Nota importante:

¡La sensibilidad y la precisión de este análisis es influenciada marcado por el funcionamiento correcto de la procedura!

1. Añada el µL 100 de la solución del substrato a cada uno bien.

2. Incube por 10 minutos en la temperatura ambiente (18 el °C – °C) 25 incube por 7 minutos en la temperatura ambiente (°C 26 – el °C) 29 incuba por 5 minutos en la temperatura ambiente (más °C) de 29

3. Pare la reacción enzimática añadiendo 100 que el µL de para la solución a cada uno bien.

4. Determine la absorción (OD) de cada uno bien en 450 el ± 10 nanómetro con un lector de la placa de microtítulo.

Se recomienda que los pozos estén leídos en el plazo de 10 minutos después de añadir la solución de la parada.