Immunoensayo de la enzima del bocadillo de Elisa del equipo de la prueba de HBsAg del certificado del GMP para el ser humano

Prueba de HBsAg Elisa para detectar el antígeno de la superficie de la hepatitis B, 96wells/kit, método del bocadillo de Elisa, para la medida cuantitativa

Uso previsto

El equipo de la prueba de HBsAg EIA es un immunoensayo de la enzima de un paso para la detección cualitativa de antígeno de la superficie de la hepatitis B (HBsAg) en suero o plasma humano. Se piensa para defender y como ayuda en la diagnosis de la infección posible de la hepatitis B.

Resumen

HBsAg es uno de los marcadores más tempranos que aparecen en la infección de siguiente de la sangre con el virus (HBV) .1 que esta infección del hígado se transmite a través de contacto sexual, de la hepatitis B la exposición llevada sangre, transmisión de la madre al niño durante la entrega, distribución de los objetos que perforan el contacto de la piel, del niño-a-niño y del hogar. Los cuatro subtipos principales de HBsAg incluyen el adw, el efecto negativo del medicamento, el ayw, y Ayr, compartiendo todo el determinante común ‘a’. La infección de HBV causa una amplia variedad de daño hepático tal como infección uno mismo-limitadora aguda, hepatitis que fulmina, hepatitis crónica con la progresión a la cirrosis y a la insuficiencia hepática, y estado crónico asintomático del portador. En gente infectada HBV, el virus persiste para el resto de sus vidas y puede ser pasado encendido a otras. Por lo tanto, la hepatitis B se ha convertido en un problema de salud pública global. La infección con HBV da lugar al aspecto de varios marcadores serológicos y uno del primer de tales marcadores es antígeno de la superficie de la hepatitis B (HBsAg). HBsAg aparece 1-10 semanas después de la exposición y antes de pruebas bioquímicas de la enfermedad del higado o de jaundice.2, 3 tres semanas después de que el inicio de la mitad aguda de la hepatitis casi de los pacientes todavía será positivo para HBsAg. En el estado crónico del portador, HBsAg persiste por 6-12 meses sin la seroconversión a los anticuerpos correspondientes. Por lo tanto, el defender para HBsAg se recomienda altamente para todos los donantes, mujeres embarazadas y gente en grupos de alto riesgo. El equipo de la prueba de HBsAg EIA es un immunoensayo de la tercera generación para la detección cualitativa de la presencia de antígeno de la superficie de la hepatitis B en suero o espécimen del plasma. La prueba utiliza los anticuerpos monoclonales para detectar selectivamente diversos subtipos de HBsAg en suero o plasma

Pruebe el principio

El equipo de la prueba de HBsAg EIA es un immunoensayo cualitativo de la enzima de la fase sólida basado en un principio del bocadillo para la detección de HBsAg en suero o plasma humano. La placa del microwell está cubierta con los anticuerpos monoclonales específicos a los diversos subtipos de HBsAg. Durante la prueba, el espécimen y los anticuerpos enzymeconjugated de HBsAg se añaden a la placa cubierta anticuerpo del microwell y después se incuban. Si el espécimen contiene HBsAg, atará a los anticuerpos cubiertos en la placa del microwell y atará simultáneamente a la conjugación para formar complejos inmovilizados de la anticuerpo-HBsAg-conjugación. Si el espécimen no contiene HBsAg, los complejos no serán formados. Después de la incubación inicial, la placa del microwell se lava para quitar los materiales desatados. El substrato A y el substrato B se añaden y después se incuban para producir un color azul, indicando la cantidad de HBsAg presente en el espécimen. La solución ácida sulfúrica se añade a la placa del microwell para parar la reacción que produce un cambio del color de azul al amarillo. La intensidad del color, que corresponde a la cantidad de HBsAg presente en el espécimen, se mide con un lector del microplate en 450/630-700 nanómetro o 450 nanómetro.

Los equipos cerrados de la prueba se deben almacenar en 2-8°C. NO CONGELAN EL EQUIPO COMPONNETS. La placa de microtítulo se debe mantener un bolso sellado para minimizar la exposición al aire húmedo. El uso encima de los reactivo después del equipo se desempaqueta cuanto antes.

Diluya el concentrado del almacenador intermediario del lavado 20X con 1:20 desionizada o del agua destilada. Por ejemplo, 5 ml de concentrado del almacenador intermediario del lavado se deben diluir a un volumen total de 100 ml con desionizado o agua destilada

1. Un funcionamiento es válido si:

1) El complemento completo de controles de los espacios en blanco, positivos y negativos se debe incluir en cada análisis.

2) Los valores negativos del control deben tener una absorción y un ≤0.10 después de restar el espacio en blanco.

3) El valor positivo del control debe tener absorción ≥1.00 después de restar el espacio en blanco.

2. cálculo del valor cortado (COV)

El medio de la negativa controla (NCx) * 2,1

Si el valor del OD del control negativo es menos de 0,05, debe ser divulgado como 0,05. Si es más de 0,05, debe ser divulgado como el valor real del OD medido.

Lectura positiva del OD: valor del ≥Cut-off

Lectura negativa del OD: < Cut-off="" value="">

Este análisis fue estandardizado contra los estándares de referencia proporcionados del laboratorio de referencia para el producto bajo Ministerio de Sanidad, China de la inmunología.

Especificidad clínica: La especificidad clínica de este análisis era determinada por un panel de las muestras obtenidas a partir de 2500 donantes de sangre sanos y de 300 pacientes hospitalizados undiagnosed. Las muestras en varias ocasiones reactivas y las muestras confirmaron el positivo con la prueba de la referencia no fueron incluidas en el cálculo de la especificidad.