Immunoensayo cualitativo de la enzima de Elisa del anticuerpo de HBeAb del diluyente estándar rápido de la prueba 3ml

La prueba del anticuerpo ELISA de HBeAb detecta el anticuerpo anti-HBe, 96wells/kit, método del bocadillo de Elisa, para la medida cuantitativa

Nombre de producto:

Equipo de la prueba del anticuerpo ELISA de HBeAb

Equipo anti-HBe de la prueba del anticuerpo ELISA

Uso previsto:

El anticuerpo anti-HBeAg (HBeAb) EIA es un immunoensayo cualitativo de la enzima para la detección de anticuerpo al antígeno de e del virus de la hepatitis B (HBe) en suero o plasma humano.

Resumen:

La presencia de anticuerpo contra el antígeno viral de la hepatitis B e se utiliza como indicador para (1) el antigenemia temprano de HBs antes del pico de la réplica viral y (2) la convalecencia temprana cuando HBeAg ha disminuido debajo de niveles perceptibles. Es también útil confirmar una seroconversión. La seroconversión de la positividad de HBeAg a la positividad anti-HBe indica un nivel reducido de virus infeccioso porque la réplica del virus ha disminuido.

La prueba anti-HBe del anticuerpo es un immunoensayo competitivo de la enzima en el cual los anticuerpos antis-HBe de especímenes compiten con una cantidad constante de anticuerpo anti-HBe conjugado (HRP) de la peroxidasa del rábano picante para un número limitado de HBeAg en el reactivo de neutralización añadido al pozo. El pozo del microtítulo está cubierto con los anticuerpos policlonales contra HBeAg como colector para HBeAg. Un espécimen del suero se añade a los pozos del microtítulo así como el anticuerpo anti-HBe conjugado HRP así como a HBeAg en reactivo de neutralización. Después de la incubación, los anticuerpos antis-HBe en espécimen, si presente, compiten con cantidad constante de anti-HBe HRP-conjugada para la cantidad limitada de HBeAg añadieron en los pozos. Las conjugaciones desatadas de la enzima serán quitadas y la solución del substrato del cromógeno que contiene el peróxido de hidrógeno se añade a los pozos para el desarrollo del color. Así, la cantidad de límite anti-HBe HRP-conjugado al pozo es inverso proporcional a la concentración de anticuerpo anti-HBe en el espécimen. La absorción de controles y de especímenes es resuelta usando lector del EIA con la longitud de onda fijada en 450 nanómetro.

Regentes proporcionados

1. Microtitre cubrió la placa (96 pozos) – 1 ningún

2. conjugación de la biotina del ser humano, 1ml – 1 frasco

3. estándar, 3200U/L, 0.5ml – 1 frasco

4. conjugación de Streptavidin HRP, - 6 ml

5. almacenador intermediario del lavado (30X) – 20ml

6. diluyente estándar – 3ml

7. substrato A – 6ml

8. substrato B – 6ml

9. pare la solución – 6ml

10. manual de la instrucción

PRUEBE EL PRINCIPIO

Este análisis se basa en el análisis enzima-ligado bocadillo del inmunosorbente (ELISA). Las muestras que contienen los anticuerpos contra el virus e de la hepatitis B reaccionan con el virus cubierto primero e de la hepatitis B del antígeno en el pozo. Después de la incubación, la biotina etiquetó el antígeno (virus de la hepatitis B e) se añade en los pozos. Streptavidin-HRP se añade para formar un complejo inmune. Después de la incubación, el lavarse se hace para quitar el complejo desatado. El substrato de TMB se añade a los pozos. La cantidad de substrato hidrolizado se lee en un lector del microplate y es directamente proporcional a la concentración de anticuerpos contra el virus E. de la hepatitis B.

MÉTODO DE PRUEBA

1. permita que todos los reactivo alcancen temperatura ambiente antes de usar.

2. dispense un descenso (UL 50) del espécimen, del control positivo así como del control negativo en pozos respectivos.

3. añada un descenso (UL 50) de la conjugación de la enzima a cada uno bien, seguida por un descenso (UL 50) del regente de neutralización. Mézclelos suavemente remolinando la placa de microtítulo en el banco plano por 2 Min.

4. coloque la placa de microtítulo en una caja humedecida e incube en 37o C por 60 Min.

5. Lave cada uno pozo 6 veces llenando cada uno bien del almacenador intermediario diluido del lavado, después invirtiendo la placa vigoroso para salir toda la agua y bloqueando el borde de cada uno bien en el papel absorbente por algunos segundos.

6. añada 1 descenso (UL 50) de la solución A del substrato a cada uno bien, después añada 1 descenso (UL 50) de la solución B del substrato a cada uno bien. Mézclese suavemente e incube en la temperatura ambiente por 15 Min.

7. la inspección visual de la coloración en cada uno pozo o añade un descenso (UL 50) del para la solución a cada uno bien para parar la coloración. Lector en blanco del EIA con un pozo del control en blanco y valores entonces leídos de O.D. de todas las muestras en 450 nanómetro.

Características de funcionamiento:

Observe por favor que esta validación está realizada en nuestro laboratorio y no será duplicada necesariamente en su laboratorio. Estos datos se han generado para permitir al usuario conseguir un avance del análisis y las características del equipo y son genéricos en naturaleza. Recomendamos que el usuario se realiza en el mínimo; el análisis del punto y de la recuperación y el análisis de las linearidades del dilutional para asegurar resultados de la calidad. Para una validación más completa, el usuario puede funcionar con los protocolos según lo sugerido por nosotros adjunto abajo para desarrollar los parámetros para que el control de calidad sea utilizado con el equipo.

Sensibilidad: Límite de detección: Se define como la concentración perceptible más baja correspondiente a una señal del medio de ‘0" estándar más 2* SD. 10 réplicas de ‘0" los estándares fueron evaluadas y el LOD fue encontrado para ser 10 U/L.

Precisión:

precisión del Intra-análisis: 3 muestras con el ser humano bajo, medio y de alto nivel HBeAb fueron probadas 20 veces en una placa, respectivamente.

precisión del Inter-análisis: 3 muestras con el ser humano bajo, medio y de alto nivel HBeAb fueron probadas en 3 diversas placas, 8 réplicas en cada placa. CV (%) = Intra-análisis 100 de SD/mean x: CV<10>

Ver1.0 5