Antígeno de diagnóstico veterinario Microplate revestido de los equipos de la gripe aviar H9N1 para personal

Equipo de la prueba del anticuerpo ELISA de la gripe aviar H9N1 de la alta exactitud, 96wells/kit, para uso profesional

1. escrito

La gripe aviar (gripe aviar, AI) es una enfermedad infecciosa de la toxicidad venérea aguda del contacto contra la industria nacional de las aves de corral actualmente. La vacunación es la mayoría del modo eficaz de prevenirlo y de controlar, el nivel del anticuerpo después de que sea inmune refleja el efecto vaccíneo, que se relacionó directamente con la resistencia inmune al virus de gripe aviar en multitudes del pollo.

Este producto es aplicable a la diversa especie, diversa edad en la detección específica del anticuerpo del suero del pollo de H9N1. Puede ser utilizado por el tiempo inmune vaccíneo del virus H9N1 del análisis, evaluación del efecto inmune, pollos con H9N1 en la situación inmune.

2. principio

El equipo se basa en un immunoensayo enzimático indirecto (ELISA indirecto). El antígeno está revestido en las placas. Cuando un suero de la muestra contiene los anticuerpos específicos contra virus, atarán al antígeno en las placas. Lave los anticuerpos desatados y otros componentes. Entonces añada una conjugación específica de la enzima. Después de la incubación y del lavado, añada el substrato de TMB. Una reacción colorimétrica aparecerá, medido por un espectrofotómetro (450 nanómetro).

3. componentes

4. Preparación de la muestra

1) Tome la sangre entera animal, consiga el suero por el método regular, la necesidad del suero de estar claro, ninguna hemólisis, ninguna contaminación. Para el almacenamiento a corto plazo, la muestra puede almacenar en 2~8℃, para el almacenamiento de larga duración, en -20℃.

2) Suero diluído con diluyente de la muestra en 100 veces (por ejemplo añada el suero 2μl en diluyente, agitación de la muestra 198μl uniformemente). El control positivo y el control negativo no necesitan diluído.

3) Vuelva la solución que se lava concentrada 20x en la temperatura ambiente (alrededor 25℃) antes de usar, sacuda para disolver la sal precipitada, después dilúyala con agua destilada o agua desionizada en 20 veces.

5. Método de prueba

1) Vuelva el equipo a la temperatura ambiente para 30mins antes de usar.

2) Tome el microplate necesario de la cantidad bien, fije 1 bien de control en blanco bien, 2 pozos de control negativo bien, 2 pozos de control positivo bien, selle la placa inusitada, almacénela en 2~8℃.

3) Añada el diluyente de la muestra 100ul en control en blanco bien. Añada el control negativo al control negativo bien, 100μl/well, control positivo al control positivo bien, 100μl/well; para la muestra bien, añada el suero diluido 100μl/well;

4) Mézclese uniformemente, incubación en el ℃ 37 por 30 minutos.

5) Deseche el líquido de los pozos y llene todos los pozos de la solución que se lava, incube para 30s y deseche. Repita la procedura 5 veces tan arriba, palmadita de secarse.

6) Añada la conjugación de la enzima a cada bien, 100μl/well. (Excepto pozo del control en blanco)

7) Incubación en el ℃ 37 por 30 minutos.

8) Lavado como paso 5).

9) Añada el substrato A 50μl/well, después el substrato B 50μl/well, se mezcla uniformemente, incubación en el ℃ 37 en la oscuridad por 10 minutos.

10) Añada paran la solución 50μl/well, se mezclan uniformemente, utilizan al lector de ELISA para medir valor de A en 450nm (630nm como referencia) de cada uno bien.

6. Resultados

1) Pozo negativo del control: En normal, valor de A del pozo negativo ≤0.20 del control;

2) Pozo positivo del control: En normal, valor de A del pozo positivo ≥0.60 del control;

3) Cálculo del valor de C.O: C.O= 0,13 + medio del pozo negativo del control (calcule como 0,07 cuando el medio del pozo negativo del control es más bajo de 0,07)

4) Juez del resultado:

Cuando la muestra A₄₅₀ ≥C.O, el resultado es positiva;

Cuando A450

7. Limitación

El equipo puede detectar solamente el anticuerpo de H9N1 IgG en suero o plasma del pollo cualitativo. Haga la evaluación cruda fuerte, media y débil del nivel del anticuerpo basado en valor de A.

8. Notas

1) Lleve los guantes y la ropa de trabajo cuando gestione, estrictamente suene y realice el sistema de la desinfección y del aislamiento.

2) La solución de la parada es corrosiva, evita la piel y la ropa, lavado del tacto con el agua del grifo si está tocada.

3) Microplate quitó del ambiente refrigerado debe ser balanza a secarse en la temperatura ambiente, y sella el microplate inusitado con el desecante.

4) La solución del lavado se cristaliza fácilmente en la baja temperatura, para ser vuelta a la temperatura ambiente cuando está utilizada para disolver.

5) Añada la solución que se lava a cada uno pozo completamente, para prevenir la enzima del orificio libremente, que no puede ser lavada

6) La muestra de la prueba debe estar fresca.

7) La determinación de los resultados de la prueba se debe basar en lector de ELISA.

8) Nunca mezcle los reactivo de diversos lotes.