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Probador de toxinas fúngicas ST-2000A mejorado con placa vibratoria de nivel 3, placa de tela visible
El analizador de micotoxinas ST-2000A es un instrumento analítico necesario para la detección de aflatoxinas y el ensayo por inmunoabsorción enzimática. El principio del ensayo por inmunoabsorción enzimática en fase sólida (ELISA), es decir, el ensayo por inmunoabsorción enzimática (ELISA), se compone de este instrumento y el kit B1, que se puede utilizar para determinar el contenido de aflatoxina B1 y otras micotoxinas en muestras de forma limitada y cuantitativa (si está equipado con otros kits, se pueden detectar otras toxinas). Se utiliza ampliamente en la detección de aflatoxina B1 y otras micotoxinas en alimentos, piensos, aceites, productos lácteos, medicamentos, bebidas, vino y otros productos.
Características de rendimiento:
1. Operación de visualización: pantalla LCD a color, placa de distribución de videoteléfono, visualización de información de toda la placa, operación de pantalla táctil
2. Función de placa vibratoria: velocidad de placa vibratoria de nivel 3, tiempo ajustable de 0 a 255 segundos
3. Estación de trabajo: software profesional de marcadores enzimáticos, que puede almacenar 500 grupos de programas, 100000 resultados de muestras y proporcionar modos de cálculo ricos como absorbancia, ecuación lineal, ecuación logarítmica, ecuación cuadrática, ecuación cúbica, ecuación logarítmica de porcentaje de concentración de absorbancia, función spline, tasa de inhibición, etc.
Parámetros técnicos:
Fuente de luz: lámpara halógena importada DC12V 22W
Rango de longitud de onda: 400-900nm
Filtro: 405, 450, 492, 630nm como estándar, otras longitudes de onda opcionales
Rango de lectura: 0-4.000Abs
Resolución: 0.001Abs
Error de indicación: ≤± 0.01Abs
Estabilidad: ≤± 0.003Abs
Repetibilidad: ≤ 0.3%
Tamaño: 400 mm * 260 mm * 200 mm
Fuente de luz | Lámpara halógena importada DC12V 22W |
Rango de longitud de onda | 400 - 999nm |
Filtro espectral | 405, 450, 492, 630nm y otras longitudes de onda regulares |
Alcance de las lecturas | 0.000 - 4.000Abs |
Repetibilidad | CV≤0.3% |
Estabilidad | deriva ≤±0.003Abs |
Resolución | 0.001Abs |
Error de indicación de absorbancia | ≤±0.01Abs |
Tamaño: | 400 mm * 260 mm * 200 mm |
1 Principio y aplicación
Este kit utiliza el método ELISA competitivo indirecto para detectar aflatoxina B1 (AFB1) en granos, piensos y otras muestras. El kit se compone de una placa marcada con enzimas pre-recubierta con antígeno de acoplamiento, marcador de enzima peroxidasa de rábano picante, anticuerpo, estándar y otros reactivos de coincidencia. Durante la prueba, agregue la solución estándar o de muestra, la aflatoxina B1 en la muestra y la placa enzimática están pre-recubiertas con el antígeno conjugado para competir por el anticuerpo anti-aflatoxina B1. Después de agregar el marcador enzimático, use el sustrato TMB para desarrollar el color. El valor de absorbancia de la muestra está correlacionado negativamente con el contenido de aflatoxina B1 contenido en la muestra. La cantidad residual de aflatoxina B1 en la muestra se puede obtener comparando con la curva estándar.
2 Indicadores técnicos
2.1 Sensibilidad del kit: 0.03ppb (ng/ml)
2.2 Modo de reacción: 25 ℃, 30min~15min
2.3 Límite inferior de detección:
Cereales...................................................... 0.15ppb
Pienso compuesto.......................................... 0.3 ppb
Aceite comestible, cacahuete.................................... 0.6ppb
Salsa de soja, trigo y otros piensos.............................. 0.3 ppb
Cerveza.......................................... 0.3 ppb
Vino, salsa de soja, vinagre.................................... 0.15ppb
2.4 Tasa de reacción cruzada:
Aflatoxina B1 100%
2.5 Tasa de recuperación de la muestra:
Cereales y pienso compuesto.............................. 85% ± 15%
Cacahuete.................................... 82 ± 15%
Aceite comestible.................................... 85 ± 15%
Salsa de soja, trigo y otros piensos.............................. 83 ± 15%
Cerveza.................................... 84 ± 15%
Vino, salsa de soja, vinagre............ 87 ± 15%
3 Composición del kit
Placa de marcador enzimático.................................... 96 pozos
Solución estándar (tapa negra): 1 ml cada uno
0ppb,0.03ppb,0.06ppb,0.12ppb,0.24ppb,0.48ppb
Solución estándar alta: 100ppb.............................. 1ml
Marcador enzimático (tapa roja).............................. 5.5ml
Solución de trabajo de anticuerpos (tapa azul).............................. 5.5ml
Solución de sustrato A (tapa blanca).............................. 6ml
Líquido de sustrato B (tapa negra).............................. 6ml
Solución de terminación (tapa amarilla).............................. 6ml
Solución de lavado concentrada 20X (tapa blanca)..................... 40ml
Manual de instrucciones.....................1 copia
4 Equipos y reactivos requeridos
4.1 Aparatos: probador de aflatoxinas, impresora, homogeneizador, dispositivo de secado con nitrógeno, oscilador, centrífuga, pipeta graduada, balanza (sensibilidad 0.01g)
4.2 Micro-pipeta: un solo canal 20 µ l-200 µ l, 100 µ l-1000 µ l, multicanal 300 µ l
4.3 Reactivo: metanol, n-hexano, triclorometano o diclorometano
5 Pretratamiento de la muestra
5.1 Instrucciones antes del procesamiento de la muestra:
El aparato experimental debe estar limpio y utilizar una cabeza de succión desechable para evitar la contaminación y la interferencia con los resultados experimentales.
5.2 Preparación de la solución:
Solución 1: extracto de muestra
70% metanol, es decir, V metanol: V agua desionizada=7:3.
5.3 Pasos de pretratamiento de la muestra:
5.3.1 Método de procesamiento de granos
1) Pesar 2 g de muestra triturada en un tubo de centrífuga de 50 ml, agregar 5 ml de solución de extracción de muestra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm a temperatura ambiente/10 minutos de centro de separación;
2) Tomar 0.5 ml de sobrenadante, agregar 0.5 ml de agua desionizada y mezclar bien;
3) Tomar 50 µ L Análisis.
Relación de dilución de la muestra: 5 Límite inferior de detección: 0.15ppb
5.3.2 Métodos de procesamiento para muestras con fuerte absorción de agua como cáscara de maíz y salvado de trigo
1) Pesar 2 g de muestra triturada en un tubo de centrífuga de 50 ml, agregar 20 ml de solución de extracción de muestra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm a temperatura ambiente/10 minutos de centro de separación;
2) Tomar 0.5 ml de sobrenadante, agregar 0.5 ml de agua desionizada y mezclar bien; (Para la muestra con un contenido de toxinas extremadamente alto, se puede diluir con metanol al 35% y luego analizar. Por ejemplo, tomar 0.1 ml de la solución mixta en 2) y 0.9 ml de metanol al 35% para mezclar. La relación de dilución final de la muestra es 200, y el límite de detección es 6ppb.)
3) Tomar 50 µ L Análisis.
Relación de dilución de la muestra: 20 Límite inferior de detección: 0.6ppb
Nota: Debido a que la distribución de la toxina en la muestra es desigual, es necesario tomar muestras de múltiples puntos y mezclarlas completamente antes de tomar 2 g para la prueba.
5.3.3 Método de procesamiento del pienso compuesto
1) Pesar 2 g de muestra triturada en un tubo de centrífuga de 50 ml, agregar 10 ml de solución de extracción de muestra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm a temperatura ambiente/10 minutos de centro de separación;
2) Tomar 0.5 ml de sobrenadante, agregar 0.5 ml de agua desionizada y mezclar bien;
3) Tomar 50 µ L Análisis.
Relación de dilución de la muestra: 10 Límite inferior de detección: 0.3ppb
5.3.4 Métodos de tratamiento de piensos de aceite comestible, cacahuete y alto contenido de grasa
1) Pesar 2 g de muestra triturada en un tubo de centrífuga de 50 ml, agregar 8 ml de n-hexano y 10 ml de solución de extracción de muestra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm a temperatura ambiente/10 min de centro de separación;
2) Retirar el líquido superior, tomar 0.5 ml del líquido inferior y agregar 0.5 ml de agua desionizada, mezclar bien, luego tomar 0.5 ml del líquido mezclado y agregar 0.5 ml de metanol al 35%, agitar durante 30 segundos;
3) Tomar 50 µ L Análisis.
Relación de dilución de la muestra: 20 Límite inferior de detección: 0.6ppb
5.3.5 Alimentos o condimentos como salsas, trigo, galletas, pasteles y métodos de procesamiento de piensos como concentrado de piensos
1) Pesar 2 g de muestra triturada en un tubo de centrífuga de 50 ml, agregar 10 ml de solución de extracción de muestra, agitar durante 5 minutos, 4000 rpm a temperatura ambiente/10 minutos de centro de separación;
2) Tomar 2 ml de sobrenadante, agregar 4 ml de triclorometano (o diclorometano), agitar durante 5 minutos, 4000 rpm a temperatura ambiente/10 minutos de centro de separación;
3) Transferir el líquido superior a otro recipiente, dejar el líquido inferior en espera, agregar otros 4 ml de cloroformo (o diclorometano) al líquido superior, agitar y mezclar completamente durante 5 minutos, y la temperatura ambiente es de 4000 rpm/centro de separación durante 10 minutos;
4) Retirar el líquido superior, combinar el líquido inferior dos veces y mezclar completamente;
5) Tomar 2 ml del líquido inferior combinado y secarlo por soplado bajo nitrógeno a 50-60 ℃;
6) Agregar 0.5 ml de extracto de muestra para disolver completamente la sustancia seca, y luego agregar 0.5 ml de agua desionizada para mezclar;
7) Tomar 50 µ L Análisis.
Relación de dilución de la muestra: 10 Límite inferior de detección: 0.3ppb
5.3.6 Método de procesamiento de la cerveza
1) Agitar completamente la cerveza (eliminar el CO2), tomar 2 ml de muestra de cerveza, agregar 1 ml de agua destilada, agregar 7 ml de metanol y agitar durante 5 minutos;
2) Tomar 0.5 ml de solución de muestra mixta y agregar 0.5 ml de agua desionizada para mezclar bien;
3) Tomar 50 µ L Análisis.
Relación de dilución de la muestra: 10 Límite inferior de detección: 0.3ppb
5.3.7 Método de tratamiento del vino, la salsa de soja y el vinagre
1) Tomar 2 ml de muestra, agregar 2 ml de agua destilada, agregar 10 ml de triclorometano (o diclorometano), agitar durante 5 minutos, 4000 rpm a temperatura ambiente/10 minutos de centro de separación;
2) Tomar 1 ml del líquido inferior y secarlo por soplado bajo nitrógeno a 50-60 ℃;
3) Agregar 0.5 ml de extracto de muestra para disolver completamente la sustancia seca, luego agregar 0.5 ml de agua desionizada y mezclar bien;
5) Tomar 50 µ L Análisis.
Relación de dilución de la muestra: 5 Límite inferior de detección: 0.15ppb
6 Pasos de ELISA
Sacar el reactivo requerido del entorno de almacenamiento en frío de 4 ℃ y colocarlo a temperatura ambiente durante más de 30 minutos. Puede haber cristales que deben restaurarse a temperatura ambiente para disolverse completamente cuando la solución de lavado está en almacenamiento en frío. Cada reactivo líquido debe agitarse antes de usarlo. Sacar el número requerido de placas y marcos microporosos, poner las placas microporosas no utilizadas en bolsas autosellantes y almacenarlas a 2-8 ℃.
Antes del experimento, 20 × La solución de lavado concentrada se diluye en solución de lavado de trabajo 20 veces.
6.1 Numeración: numerar los pozos correspondientes de la muestra y el estándar en secuencia, hacer dos agujeros paralelos para cada muestra y estándar, y registrar la posición del agujero estándar y el agujero de la muestra.
6.2 Reacción de adición de muestra: agregar 50 µ l/pozo de estándar o muestra en sus respectivos pozos, luego agregar 50 µ l/pozo de marcador enzimático, luego agregar 50 µ l/pozo de solución de trabajo de anticuerpos, sellar la placa con una membrana de cubierta, agitar suavemente durante 5 segundos, mezclar y reaccionar a 25 ℃ durante 30 minutos.
6.3 Lavado: Retirar cuidadosamente la membrana de la placa de cubierta, secar el líquido en el agujero, lavar completamente el agujero con solución de lavado de trabajo 250 µ l/agujero durante 5 veces, con un intervalo de 30 segundos, y secarlo con papel absorbente (las burbujas que no se eliminan después del golpe se pueden perforar con una cabeza de pistola limpia).
6.4 Desarrollo del color: agregar 50 µ l de solución de sustrato A y 50 µ l de solución de sustrato B a cada agujero, agitar suavemente durante 5 segundos y mezclar bien, y desarrollar el color en la oscuridad a 25 ℃ durante 15 minutos.
6.5 Terminación: agregar 50 µ l de solución de terminación a cada agujero, agitar suavemente y mezclar bien para terminar la reacción.
6.6 Medición del valor de absorbancia: usar el probador de aflatoxinas para medir el valor de absorbancia de cada agujero a 450 nm (se recomienda doble longitud de onda 450/630 nm). La determinación se completará dentro de los 10 minutos posteriores a la terminación de la reacción
6.7 El probador automático de aflatoxinas ST-2000A completa automáticamente la determinación y produce automáticamente los resultados.