25 humanos - vitamina Dihydroxy D; 25-dihydroxyvitamin D (3); 25-OH-DELISA Kit
Principio
Este equipo de ELISA utiliza el bocadillo-ELISA como el método. El stripplate de Microelisa proporcionado en este equipo se ha cubierto primero con un anticuerpo específico a 25 - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D). Los estándares o las muestras se añaden a los pozos apropiados del stripplate de Microelisa y combinaron al anticuerpo específico. Entonces una peroxidasa del rábano picante (HRP) - anticuerpo conjugado específico para 25 - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) se añade a cada stripplate de Microelisa bien y se incuba. Se quitan los componentes libres. La solución del substrato de TMB se añade a cada pozo. Solamente esos pozos que contienen 25 - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) y HRP conjugaron 25 - anticuerpo Dihydroxy de la vitamina D (25-OH-D) aparecerán azules en color y después darán vuelta amarillo después de la adición de la solución de la parada. La densidad óptica (OD) se mide espectrofotométrico en una longitud de onda de 450 nanómetro. El valor del OD es proporcional a la concentración de 25 - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D). Usted puede calcular la concentración de 25 - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) en las muestras comparando el OD de las muestras a la curva estándar.
Materiales proporcionados el equipo
| |
Materiales proporcionados el equipo |
48 determinaciones |
96 determinaciones |
Almacenamiento |
| 1 |
Manual del usuario |
1 |
1 |
R.T. |
| 2 |
Membrana de la placa de cierre |
2 |
2 |
R.T. |
| 3 |
Bolsos sellados |
1 |
1 |
R.T. |
| 4 |
Stripplate de Microelisa |
1 |
1 |
2-8℃ |
| 5 |
90ng/ml estándar |
botella 0.5ml×1 |
botella 0.5ml×1 |
2-8℃ |
| 6 |
Diluyente estándar |
botella 1.5ml×1 |
botella 1.5ml×1 |
2-8℃ |
| 7 |
Reactivo de la HRP-conjugación |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 8 |
Diluyente de la muestra |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 9 |
Solución A del cromógeno |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 10 |
Solución B del cromógeno |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 11 |
Pare la solución |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 12 |
Solución del lavado |
20ml (20X) ×1bottle |
20ml (30X) ×1bottle |
2-8℃ |
Notas: La curva estándar se debe incluir en cada análisis. Se recomiendan los pozos replegados. Si el valor del OD de la muestra es mayor que el primer pozo de estándares, diluya por favor la muestra (tiempos de n) antes de prueba. Al calcular la concentración original 25-OH-D, multiplique por favor el factor total del dilución (XnX5).
Cálculo de resultados
Concentraciones sabidas del ser humano 25 - el estándar Dihydroxy y su lectura correspondiente OD de la vitamina D (25-OH-D) se traza en la escala del registro (x-AXIS) y la escala del registro (y-AXIS) respectivamente. La concentración del ser humano 25 - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) en muestra es determinada por el trazado el O.D. de la muestra en Y-AXIS. La concentración original es calculada multiplicando el factor del dilución.
Precisión
precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis): 3 muestras con 25 humanos bajos, medios y de alto nivel - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) fue probada 20 veces en una placa, respectivamente.
precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis): 3 muestras con 25 humanos bajos, medios y de alto nivel - la vitamina Dihydroxy D (25-OH-D) fue probada en 3 diversas placas, 8 réplicas en cada placa.
CV (%) = SD/meanX100
Intra-análisis: CV<10>
Inter-análisis: CV<12>
Gama del análisis
3 ng/ml -80 ng/ml
