Ovejas Insulina-como el factor-Yo del crecimiento, Somatomedin, equipo de IGF-I ELISA
Principio
Este equipo de ELISA utiliza el bocadillo-ELISA como el método. El stripplate de Microelisa proporcionado en este equipo se ha cubierto primero con un anticuerpo específico a IGF-1. Los estándares o las muestras se añaden a los pozos apropiados del stripplate de Microelisa y combinaron al anticuerpo específico. Entonces una peroxidasa del rábano picante (HRP) - anticuerpo conjugado específico para IGF-1 se añade a cada stripplate de Microelisa bien y se incuba. Se quitan los componentes libres. La solución del substrato de TMB se añade a cada pozo. Solamente esos pozos que contienen IGF-1 y el anticuerpo conjugado HRP IGF-1 aparecerán azules en color y después darán vuelta amarillo después de la adición de la solución de la parada. La densidad óptica (OD) se mide espectrofotométrico en una longitud de onda de 450 nanómetro. El valor del OD es proporcional a la concentración de IGF-1. Usted puede calcular la concentración de IGF-1 en las muestras comparando el OD de las muestras a la curva estándar.
Materiales proporcionados el equipo
| |
Materiales proporcionados el equipo |
48 determinaciones |
96 determinaciones |
Almacenamiento |
| 1 |
Manual del usuario |
1 |
1 |
R.T. |
| 2 |
Membrana de la placa de cierre |
2 |
2 |
R.T. |
| 3 |
Bolsos sellados |
1 |
1 |
R.T. |
| 4 |
Stripplate de Microelisa |
1 |
1 |
2-8℃ |
| 5 |
Estándar: 27ng/ml |
botella 0.5ml×1 |
botella 0.5ml×1 |
2-8℃ |
| 6 |
Diluyente estándar |
botella 1.5ml×1 |
botella 1.5ml×1 |
2-8℃ |
| 7 |
Reactivo de la HRP-conjugación |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 8 |
Diluyente de la muestra |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 9 |
Solución A del cromógeno |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 10 |
Solución B del cromógeno |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 11 |
Pare la solución |
botella 3ml×1 |
botella 6ml×1 |
2-8℃ |
| 12 |
Solución del lavado |
20ml (20X) ×1bottle |
20ml (30X) ×1bottle |
2-8℃ |
Precisión
precisión del Intra-análisis (precisión dentro de un análisis): 3 muestras con IGF-1 bajo, medio y de alto nivel fueron probadas 20 veces en una placa, respectivamente.
precisión del Inter-análisis (precisión entre los análisis): 3 muestras con IGF-1 bajo, medio y de alto nivel fueron probadas en 3 diversas placas, 8 réplicas en cada placa.
CV (%) = SD/meanX100
Intra-análisis: CV<10>
Inter-análisis: CV<12>
Gama del análisis
0.3ng/ml -20 ng/ml
Sensibilidad:
0.05ng/ml
Notas:
- Almacene el equipo en 4°C sobre recibo. El equipo se debe equilibrar a la temperatura ambiente antes del análisis. Quite cualquier tira innecesaria de la placa Anticuerpo-revestida bovina IGF-1, reséllela en hoja zip-lock y guarde en 4°C.
- Los precipitados pueden aparecer en almacenador intermediario que se lava concentrado. Caliente por favor el almacenador intermediario para disolver todos los precipitados, que no afectarán a los resultados.
- La pipeta exacta se debe utilizar para evitar error experimental. Las muestras se deben añadir al Microplate en menos de 5 minutos. Si se incluyen un gran número de muestras, se recomienda la pipeta del canal múltiple.
- La curva estándar se debe incluir en cada análisis. Se recomiendan los pozos replegados. Si el valor del OD de la muestra es mayor que el primer pozo de estándares, diluya por favor la muestra (tiempos de n) antes de prueba. Al calcular la concentración del origina IGF-1, multiplique por favor el factor total del dilución (XnX5).
- Para evitar la contaminación cruzada, los selladores de Microplate están para el uso de una sola vez solamente.
- Guarde por favor el substrato lejos de la luz.
- Toda la operación debe ser acuerdo con las instrucciones del fabricante estrictamente. Los resultados determinados por el lector de la placa de microtítulo.
- Todas las muestras, almacenador intermediario que se lava y basuras se deben tratar como agentes infecciosos.
- Los reactivo de diversas porciones no deben ser mezclados.
