Equipo ácido nucléico principal amarillo de la detección del virus (YHV) (método RT-POLIMERIZACIÓn en cadena-fluorescente de la punta de prueba)
Uso previsto:
Este equipo es conveniente para la detección específica del virus principal amarillo patógeno (YHV) en muestras de tejido tales como papadas, glándulas de las antenas, tejidos hematopoyéticos y órganos linfáticos de la gamba de penaeus.
Principio:
Este equipo utiliza el ARN como plantilla y las cartillas como punto inicial para sintetizar los filamentos del cDNA complementarios a la plantilla del ARN bajo acción del transcriptase reverso de gran eficacia. Elija la punta de prueba específica del diseño conservador del gen del virus del cubilete del gato, la punta de prueba puede con área de la amplificación de la cartilla en el medio de una plantilla obligatoria específica de la DNA, en curso de extensión de la polimerización en cadena, las enzimas circunscritas de la polimerasa de Taq del 5" extremo de grupos fluorescentes en la punta de prueba será reducido, hacen libre en el sistema de reacción, de tal modo apagando a grupos fuera del 3" extremo, el resplandor, el ácido nucléico de la cabeza amarilla de la gamba que el virus (YHV) fue detectado por la polimerización en cadena de la fluorescencia en un sistema de reacción totalmente cerrado.
Componentes principales:
| Componente |
Especificación |
| Líquido de la reacción de la polimerización en cadena |
24 tubos |
| Control positivo |
1 tubo |
| Control negativo |
1 tubo |
Nota: los componentes en diversos lotes de equipos no deben ser permutables.
Requisitos de la muestra:
1. Tipo de la muestra
Muestras de tejido de la gamba
2. Colección de la muestra
Las muestras fueron recogidas según SNT 1151.4-2003.
Tome el tejido fresco de la gamba como muestra.
2,1 para las larvas o el camarón joven, el camarón o las cabezas entero del camarón se toma como muestras. Para quitar la cabeza, utilizar las tijeras y las pinzas de esterilización para quitar los ojos, el peto, todos los accesorios torácicos, y el abdomen detrás de la cabeza.
2,2 para el camarón adulto, los filamentos de la papada, los órganos linfáticos o la hemolinfa fueron tomados como muestras.
3. Preservación de la muestra
Puede ser almacenado por 24 horas en 2℃~8℃, y puede ser almacenado durante mucho tiempo en -20℃.
Amplificación de la polimerización en cadena y detección de la fluorescencia (área de la detección de la polimerización en cadena):
Ponga cada tubo de la reacción en el instrumento de la polimerización en cadena y realice la amplificación de la polimerización en cadena según los procedimientos siguientes:
| Paso |
Número de ciclo |
Temperatura |
Tiempo |
| 1 |
1 |
50℃ |
20min |
| 2 |
1 |
95℃ |
2min30s |
| 3 |
45 |
95℃ |
10s |
| 60℃ |
30s recogen el fluorescente |
FAM se selecciona para los canales de la detección.
Control de calidad:
- Control negativo: Ninguna curva obvia de la amplificación del canal de la detección de FAM;
- Control positivo: El canal de FAM mostró la curva obvia de la amplificación, valor ≤30 del Ct;
- Las condiciones antedichas se cumplen simultáneamente en el mismo experimento; de otra manera, el experimento es inválido y se requiere el reexaminar.
Los resultados de la interpretación
| Resultados |
Valor del Ct |
| Positivo |
Ct≤38 |
| Negativa |
Ningún valor o Ct value≥45 del Ct |
| Área de gris |
38<Ct<45> |
Nota: El resultado se juzga para ser el área gris, que necesita ser vuelta a inspeccionar. Si vuelva a inspeccionar el resultado es valor del Ct < 45="" is="" considered="" as="" positive="">
Índice del funcionamiento de producto:
1. Exactitud
Los materiales de referencia positivos de empresas de prueba eran todo positivos.
2. Límite de detección mínimo: el límite de detección de este equipo es 10copies/μL.
3. Precisión: El coeficiente de variación (CV, %) del valor del Ct de la precisión del intra-lote es el ≤5%.
4. Coeficiente de correlación linear, linear | r | > 0,980.
¡Los detalles de la operación satisfacen comprueban de IFU!
